1985年，Xu-Dong Zhu等报道了源自酿酒酵母的FLP重组酶，它是由423个氨基酸组成的单体蛋白，可以特异性识别FRT（Flp recognition target）位点。而FRT与loxP位点非常相似，同样由两个13bp的反向重复序列和一个8bp的间隔序列构成，间隔序列决定了FRT的方向。在重组方式上，Flp-FRT系统与Cre-loxP系统类似。2. Dre-Rox...
重组酶原理 重组酶是一类能够识别特定DNA序列并将其重新组合的酶。它们通过结合到DNA的两个断裂端,切割和重新连接DNA链来完成DNA的重组。 重组酶的基本工作机制如下:首先,重组酶会识别并结合到DNA的两个断裂端。然后,它们通过切割一条DNA链,形成一个单链断裂。接下来,重组酶会与另一个DNA分子的单链断裂进行配对,...
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子，Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。物质简介 Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶）是来源于噬菌体P1的一种酶蛋白，分子量约38kDa。它可以识别催化两个LoxP位点之间发生同源重组，...
RPA技术的核心在于利用多个重组酶、单链结合蛋白和链置换DNA聚合酶在恒温条件下进行靶序列的特异性扩增，由两个引物启动。具体来说，重组酶与引物结合形成核蛋白丝（nucleoprotein filaments），这些核蛋白丝能够识别并结合到双链DNA的目标区域。接着，单链结合蛋白（SSB）稳定打开的DNA双链区域，使之暴露出单链DNA模板...
最成熟的方法是基于核酸序列的扩增(NASBA,也称为转录介导的扩增,TMA)、核糖核酸(RNA)技术的信号介导扩增(SMART)、解旋酶依赖性扩增(HDA) 、重组酶聚合酶扩增(RPA)、滚环扩增(RCA)、多重置换扩增(MDA)、环介导等温扩增(LAMP)和链置换扩增(SDA);读者可以在几篇评论中参考这些方法的详细信息。 特别是重组酶聚合...
1.重组酶原理: 重组酶是一种能够重组DNA分子的酶。它通过识别DNA双链上的特定序列,将不同DNA分子之间的断裂端或尾端相互连接,从而实现DNA的重新组合。重组酶通常包括不同亚型,最常见的一种是肺炎链球菌的RecA蛋白。重组酶的原理主要包括以下几个步骤: - DNA的双链断裂:重组酶首先通过识别DNA双链上的同源序列,引...
重组酶的原理主要包括基因工程技术、DNA重组技术和蛋白质工程技术。首先,基因工程技术通过DNA重组技术将感兴趣的基因片段插入到表达载体中,然后在宿主细胞中进行表达。这些基因片段可以来自不同的生物体,经过重组而成。其次,蛋白质工程技术通过对重组基因进行改造,使得其编码的蛋白质具有特定的功能和特性。这些技术的结合,...
RecBCD由3个不同的次单位所组成,分别是RecB、RecC与RecD(其中RecB与RecD是解旋酶)。在大肠杆菌体内用来起始DNA同源重组。RecBCD同时也作为模式酵素,用来当作实验中所使用的单分子萤光,以了解蛋白质与DNA的交互作用。反馈 收藏
2024年6月，一项研究揭示了RNA指导的重组酶的新特性，这些酶可以通过一种称为“桥RNA”（bRNA）的特殊工具，在基因组的指定位置精确地插入或删除DNA序列。bRNA像是这些重组酶的GPS导航系统，指引它们到达特定的“目的地”。想象一下，这些重组酶就像是一群受过专业培训的修理工，而bRNA则是他们的图纸和指南，确保...