样本重度挂孔、拖尾、弥散,首先考虑上样浓度问题,浓度太高80%会出现样本挂孔拖尾现象,样本沉淀在加样孔上。对于诱导表达后的菌液来说,OD值一般都会大于2.0,直接菌液离心重悬煮样上SDS,就会出现挂孔现象,挂空滤百分百,在加样的时候也会看出来,样本是一小坨掉入孔底,而不是很顺滑的流入孔底。其次,煮后的样本...
根据SDS-PAGE电泳的原理可知，SDS-PAGE可以间接判断蛋白质样品的纯度，将未知纯度的蛋白质样品进行SDS-PAGE凝胶电泳，观察电泳结束后产生的蛋白条带，若凝胶上有且仅有一个蛋白条带，则说明该蛋白样品只含有一种蛋白质；反之，若观察到不止一个分布不同的蛋白条带，则说明该蛋白样品含有除目标蛋白以外的其他蛋白质。
博后的第一个实验就是跑蛋白电泳,博士的时候做这个实验都是自己配的浓缩胶和分离胶。新的实验室则是直接用买好的预制胶。说一下用的两款预制胶出现的bug。 1.伯乐的胶 一定一定要撕胶板下的胶条,不撕是不通电的,没有电流。上好样后发现胶条没撕,内心是崩溃的。伯乐的梳子真的好难拔啊,很容易把孔拔烂,...
SDS-PAGE是一种聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，适用于蛋白质的分离。该技术最初由Shapiro在1967年创立。通过向样品和凝胶中添加离子去污剂SDS和强还原剂，如巯基乙醇或二硫苏糖醇，蛋白质的亚基电泳迁移率主要取决于其分子量，电荷因素可忽略。SDS是一种阴离子去污剂，作为变性剂和助溶剂，它能打断分子内的氢键...
解析 你好,SDS-PAGE跑电泳时,跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的。具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定,而且这个时间的要求不会很严格,也就是说对电压的要求不严。我做这个试验时,师姐给我讲的是由80变到120~140即可希望有所帮助,不懂可以追问,有帮助请采纳 ...
第二:把第一条strip放在成品胶(SDS-PAGE的那个胶)顶部,用琼脂(agarose)凝固了2个小时,然后再跑SDS-PAGE.跑前这块成品胶都好好的,但是跑完胶(2个小时)以后,成品胶就连同上面的strip一起被挤出了原来的槽子.有朋友说可能是跑胶的时候温度太高,让胶胀大了.我就把胶放在4度的冷冻室里面跑,但是成品胶还是被...
SDS-PAGE(Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis)是一种常用的蛋白质分析技术,可以根据蛋白质的分子量进行分离.本文介绍了SDS-PAGE电泳中蛋白质标记跑不开的原因,包括电泳条件不适当、样品处理不当、电泳胶问题以及蛋白Marker的问题.
灌胶完成后怎么跑胶呢?视频教你7步完成 Okay now that you know how to cast an SDS-PAGE gel, how exactly do you use it? Here, Dan shows you how to set up your apparatus to run SDS-PAGE — everything in 7 easy steps. WAIT!!
在进行sds-page电泳时，如果上样缓冲液混合后进行了变性处理，确保温度超过95°C，时间控制在5到10分钟，即便没有把握，也建议处理10分钟以确保充分变性。然而，即便如此，如果蛋白条带仍然没有跑出，或者连分子量标记（marker）都没有显现，可能的原因之一是漏胶。在制胶过程中，封胶环节至关重要。
条带出现弯曲的情况，通常会让人联想到一个哭脸的形状，这种情况的出现主要有两个原因。首先，电泳缓冲液的不干净是导致条带弯曲的一个重要原因。电泳缓冲液是维持电泳过程稳定进行的关键因素，如果缓冲液含有杂质，可能会干扰蛋白质的迁移，导致条带弯曲。因此，使用高质量、干净的电泳缓冲液对于确保电泳...