样本重度挂孔、拖尾、弥散,首先考虑上样浓度问题,浓度太高80%会出现样本挂孔拖尾现象,样本沉淀在加样孔上。对于诱导表达后的菌液来说,OD值一般都会大于2.0,直接菌液离心重悬煮样上SDS,就会出现挂孔现象,挂空滤百分百,在加样的时候也会看出来,样本是一小坨掉入孔底,而不是很顺滑的流入孔底。其次,煮后的样本...
SDS-PAGE即聚丙烯酰氨凝胶电泳 详细资料如下: 聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开:蛋白大小,…
【实验】SDS-PAGE蛋白凝胶电泳的基本原理,操作方法,注意事项,制胶,上样,跑胶,观察,拍照,蛋白胶,保姆级教程, 视频播放量 61570、弹幕量 147、点赞数 1395、投硬币枚数 504、收藏人数 2986、转发人数 939, 视频作者 植物百科, 作者简介 一个实验型up,偶尔猎奇。,相
SDS-PAGE跑电泳时,跑到浓缩胶和分离胶分界处时一般是要换电压的。具体是40变60还是80变120要根据实际试验的时间来确定,而且这个时间的要求不会很严格,也就是说对电压的要求不严。我做这个试验时,师姐给我讲的是由80变到120~140即可希望有所帮助,不懂可以追问,有帮助请采纳 结果一 题目 SDS-PAGE跑电泳时,跑到...
细菌的膜蛋白用TritonX-100抽提后,跑SDS-PAGE,结果一开始浓缩压不成一条直线,进入分离胶后出现拖尾现象,过夜染色,脱色后发现条带就花了. 相关知识点: 试题来源: 解析 根据我的经验猜测,SDS-PAGE跑得不好看多半是因为胶配的不好.聚合时间一定要充足,分离胶聚合1小时以上,积层胶要聚合2~3小时效果比较好.对于...
2、对照和粗酶看着像自己提的,纯度不够,浓度或者加样量调低点试试;3、sds-page跑得丑太正常了,...
没点marker,不太能确定到底是加样的问题还是跑胶的问题。 第一张图我怀疑是不是没洗干净,同一泳道的颜色是不均一的。好好洗一下应该会好一些。 背景色其实还好,二四道跑的就挺好。其他道再洗一洗。 抛开洗的问题,下面简单分析一下这里某些条带:
如果在sds-page实验中未能检测到蛋白条带,甚至没有marker条带,这通常表明sds-page胶存在某些问题。marker条带主要由不同分子量的蛋白构成,因此如果没有出现marker条带,很可能意味着胶本身存在问题。检查胶的制作过程是关键步骤。这包括仔细核对所有配胶试剂,如浓缩胶和分离胶的成分和比例。同时,确保...
1 上样量太少,或者电泳时候loading buffer不行,导致蛋白跑了2 脱色时间不够,建议K-G染色后,脱色液在30min内换两次3 重新按标准配置电泳缓冲液.相关推荐 1SDS-PAGE跑了4、5回了,条带颜色总是特别浅看不清楚,连MARKER都看不清楚,是怎么回事啊?连着练了好几天了,每次都不出结果,用相同的样品在别人制的胶上...
1.酶的变性 蛋白酶变性:在 SDS-PAGE 过程中,SDS 可能导致蛋白质发生变性。某些蛋白酶在处理过程中...