染色不充分:如果在染色过程中使用的染料(如考马斯亮蓝或银染)浓度不足或染色时间不够,可能导致条带...
如果在sds-page实验中未能检测到蛋白条带,甚至没有marker条带,这通常表明sds-page胶存在某些问题。marker条带主要由不同分子量的蛋白构成,因此如果没有出现marker条带,很可能意味着胶本身存在问题。检查胶的制作过程是关键步骤。这包括仔细核对所有配胶试剂,如浓缩胶和分离胶的成分和比例。同时,确保...
可能是染色或脱色步骤出现问题。例如,染色时间不足,或者脱色过度,都可能导致看不到条带。需要确保正确地进行染色和脱色步骤。 4. 凝胶问题 :凝胶的制备也可能影响条带的形成。例如,凝胶的浓度不适合你的蛋白质,或者凝胶制备过程中出现问题,都可能导致看不到条带。需要确保凝胶的制备正确,并且选择合适的凝胶浓度。 5...
广告 sds-page蛋白上样缓冲液(1x)如何定量蛋白? 已经加蛋白缓冲液难定量,面溴酚蓝,绝部蛋白定量试剂测定吸光值都溴酚蓝干扰,准确定量.测测280试试,先测缓冲液,干扰再测 琼脂糖电泳没跑出条带的原因 点样没点好或者制孔没制好,样品没提出DNA根据目的条带长度来调整凝胶浓度,一般1.5%左右,也不一定。 紫外灯...
染色后,还需要脱色液(有乙醇、醋酸)脱色,不脱色的话全是蓝色,不能区分条带。脱色后,条带才能显示出来。在跑SDS-PAGE时,需要点Marker,正常情况在染色、脱色后能至少看到Marker的条带。如果Marker都没有,那就是电泳问题了。蛋白浓度不够、跑胶的时间过长或过短、仪器问题、正负极不要插反。
可能有几个原因:一:上样缓冲液,用分子克隆上的配方做一次试试看(你所用的缓冲液是不是很久了?)二:如果你染色,脱色都没有问题,PAGE胶是不会说谎的 三:不知道你是在哪种波长下所测得有数值?280nm是共轭双键的吸收波长,很多物质都会有吸收,如果做亲和层析时咪唑也有吸收,RNA在280下也有...
染色后,当然还需要脱色液(有乙醇、醋酸)脱色,不脱色的话全是蓝色,不能区分条带。脱色后,条带才能显示出来。在跑SDS-PAGE时,需要点Marker,正常情况在染色、脱色后能至少看到Marker的条带。如果Marker都没有,那就是电泳问题了。
SDS-PAGE不出条带已有2人参与 样品是细菌发酵产物,硫酸铵沉淀后过G25脱盐,再过离子交换柱。透析除盐,冷冻干燥之后得到的。12%分离胶(200V,40min),5%浓缩胶(80V,30min)。样品和BSA一样的处理条件,但是不出条带。样品设置三个梯度浓度1mg/ml,5mg/ml,10mg/ml,定量方法是称量冻干粉去离子水溶解的。但是有人...
上样缓冲液混合后进行变性,温度必须要超过95°,时间5—10min,如果没把握,可以处理10min。也有可能是漏胶,制胶时封胶要严,操作不熟练时可以多加一点,待聚合后用去离子水加入电泳槽内,看看是否会漏,如果不会把水倒掉,滤纸吸干后再加入凝胶。加样的问题,加样时注意不要刺破凝胶,以避免样品...