荧光素酶(英文名称:Luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称,其中最有代表性的是一种学名为Photinus pyrali'的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。没有荧光素酶的情况下,萤光素与氧气反应的速率非常慢,而钙离子的存在常...
源自萤火虫,61kDa,需要ATP。 底物一般用的是D-荧光素钾盐或者钠盐。 Renilla Luciferase(Rluc) 第二种是海肾荧光素酶,36kDa,不依赖ATP。 NanoLuc(Nluc) 源自深海细脚刺虾,是一个经过基因工程改造的小分子酶(19.1kDa,171个氨基酸,513bp),是Promega的专利萤光素酶,结构简单,没有翻译后修饰或者二硫键。它使用一种...
1. 在萤光素酶存在的条件下,萤光素+ATP生成萤光素化腺苷酸+ ADP。 2. 将萤光素化腺苷酸+氧气转化为氧化萤光素+AMP以及光。 萤火虫荧光素酶一般是作为主报告基因,将目的基因构建在该载体上,从而反应目的序列的作用结果,因此根据我们的实验目的,可以针对此质粒进行改造,载体的工作原理如下图所示: 海肾荧光素酶催...
荧光素酶来源于萤火虫提取 可用于活体荧光成像技术研究 湖北速普尔化工有限公司5年 月均发货速度:暂无记录 湖北 武汉市 ¥380.00 荧光素酶萤火虫来源 CAS:61970-00-1 工业化生产 湖北速普尔化工有限公司5年 月均发货速度:暂无记录 湖北 武汉市 ¥510.00 ...
一、 双载体系列(两种荧光素酶分别位于两个载体上): 目前,常用的F-Luc载体大多以pMIR-REPORT载体、pGL3系列载体为主;R-Luc载体大多以pRL系列载体为主。 (1)pMIR-REPORT载体 (2)pGL3系列载体 PGL3系列载体包括Promoter、Enhancer、Basic以及Control,都含有萤...
荧光素酶报告原理（Rachael Kenworthy et al. 2009. Nucleic Acids Res）如果我们想要研究某个转录因子是否能与某一靶启动子片段有作用。首先将靶基因启动子或其他待研究基因调控元件插入到荧光素酶报告基因前方，构建成报告基因质粒。然后，将可以表达待检测转录因子质粒与报告基因质粒共转染细胞；如果此转录因子能够激活...
荧光素酶的应用 (一)：pGL3-Basic---用于转录因子结合位点与启动子活性分析。把待分析启动子区段构建到F-Luciferase上游，和转录因子共转染分析F-Luciferase活性即可反应启动子的活性高低。该质粒通常需要结合持续性表达R-Luciferase的载体作为内参以校正不同样品之间转染的转染效率。启动子的作用相当于“基因开关”，...
目前，以北美萤火虫（Photinus pyralis）来源的荧光素酶（Fluc）应用的最为广泛，应用于分子生物学和生物分析系统，Fluc具有信号强，背景干扰弱，蛋白稳定耐热性强，无需表达后修饰等特点，此外，其底物也无毒且十分稳定，非常适用于体内或者体外实验。Fluc是腺苷酸形成酶(adenylate-forming enzymes)超家族的一员，其利用...