荧光分析测定是在很弱背景下的发射光强度,且其测定的灵敏度取决于检测器的灵敏度,即只要改进光电倍增管和放大系统,使其微弱的荧光液能被检测到,就可以测得很稀的溶液,因此荧光分析法的灵敏度很高。 而紫外-可见分光光度法测定的是透过光强和入射光强的比值(I/I0),当浓度很低时,检测器难以检测两个大信号(I/I...
荧光偏振能量转移(FRET)是研究蛋白质之间相互作用的一种比较直观的方法。 例如发表在Science Signaling上的这篇文章就用到了荧光共定位分析[1]: 为了证明NPY-pH(用绿色荧光标记)这种蛋白被分选在了某种类型的囊泡中,对这种囊泡的两种marker——Sgll和CGRP进行染色(用红色荧光标记),然后进行共定位分析。如果绿色荧光...
原子荧光光谱分析法(AFS,Atomic fluorescence spectrometry),是利用原子荧光谱线的波长和强度进行物质的定性及定量分析方法,是介于原子发射光谱(AES)和原子吸收光谱(AAS)之间的光谱分析技术。简介 原子荧光光谱分析法的基本原理是原子蒸气吸收特征波长的光辐射之后,原子被激发至高能级,在跃迁至低能级的过程中,原子...
荧光分析就是基于物质的光致发光现象而产生的荧光的特性及其强度进行物质的定性和定量的分析方法。目前,也广泛地作为一种表征技术来研究体系的物理、化学性质及其变化情况,例如生物大分子构象及性质的研究。 荧光光谱适用于固体粉末、晶体、薄膜、液体等样品的分析。根据样品分别选配石英池(液体样品)或固体样品架(粉末或...
在荧光分析中,有一些重要的名词需要我们了解和解释。 1.荧光 荧光是一种现象,即物质在受激发光后,再释放出较长波长的光子。当样品受到激发光照射时,其内部电子会跃迁到高能级,随即又回到基态,放出持续时间短暂的荧光光子。荧光分析通过测量这些荧光光子的强度和频率来获取样品的信息。 2.激发 激发是指通过给样品...
分析对象 激发光波长范围 •原子荧光分析•分子荧光分析•紫外-可见荧光分析•红外荧光分析•X射线荧光分析 1575年,西班牙医生N.Monardes发现。1852年,Stokes对荧光产生的机理作了解释,并提出了“荧光”。 1867年,首次用于分析测定。1928年,Jette和West提出第一台光电荧光计。19...
(1.1)打开待分析图片: (1.2)Image -> Color -> Split channels拆分荧光通道: (1.3)Plugins -> Colocalization Finder分析红绿通道共定位情况: 得到共定位散点图,散点图越接对角线共定位程度越高: 散点图颜色的深浅代表其出现的频率,Plugins -> 3D -> Inter...
荧光分析是指利用某些物质被紫外光照射后处于激发态,激发态分子经历一个碰撞及发射的去激发过程所发生的能反映出该物质特性的荧光,可以进行定性或定量分析的方法。由于有些物质本身不发射荧光(或荧光很弱),这就需要把不发射荧光的物质转化成能发射荧光的物质。例如用某些试剂(如荧光染料),使其与不发射荧光的物质生成...
是研究特异蛋白抗原在细胞内分布的一种常用实验技术,通过荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下对抗原进行细胞定位。 但免疫荧光的照片不仅仅可以做形态学分析,还能通过检测平均荧光强度,对特异性蛋白表达进行半定量分析。 在进行平均荧光强度检测之前,首先要清楚平均荧光强度的定义。