本发明涉及一种人脐带间充质干细胞来源的外泌体、鉴定方法及应用。本发明发现,由人脐带间充质干细胞分泌出的外泌体可以被心肌细胞摄取且可以有效改善柯萨奇B3(CVB3)诱导病毒性心肌炎小鼠(VMC)的心脏功能、抑制心肌炎小鼠心脏细胞的凋亡,且可以有效抑制CVB3诱导体外培养人源心肌细胞(HCMs)细胞凋亡。按照本发明,可以实...
方法:培养人脐带间充质干细胞并采用超滤序贯超离法提取外泌体,通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、蛋白质定量、蛋白质印迹法及蛋白组学分析等技术鉴定。 结果与结论:①提取的外泌体分散度较好且均一,多为杯状圆形或类圆形的膜性小囊泡,可见囊泡的双膜性结构,中央为低电子密度成分,分布较集中且边界清晰;②外泌体粒...
脐带间充质干细胞(HUCMSC)来源的外泌体表现出在创伤修复和组织重建、炎症反应、缺血性疾病等方面丰富的治疗潜能 [4] ,且脐带组织来源丰富、取材较为容易。因此本实验拟对HUCMSC外泌体的提取及鉴定进行研究,以验证HUCMSC可作为外泌体体外大量制备的一种选择方法。资料与方法足月产新生儿脐带均来源于我院,经捐赠者...
摘要 本发明涉及一种人脐带间充质干细胞来源的外泌体、鉴定方法及应用。本发明发现,由人脐带间充质干细胞分泌出的外泌体可以被心肌细胞摄取且可以有效改善柯萨奇B3(CVB3)诱导病毒性心肌炎小鼠(VMC)的心脏功能、抑制心肌炎小鼠心脏细胞的凋亡,且可以有效抑制CVB3诱导体外培养人源心肌细胞(HCMs)细胞凋亡。按照本发明...
1、本发明的目的是为了克服现有技术存在的缺点和不足,本发明提供一种无血清体系培养人脐带间充质干细胞来源的外泌体制备和鉴定方法,其制备过程包括以下步骤。 2、步骤一:分离人脐带间充质干细胞(hucmsc)并用无血清培养基培养到p3代;培养的细胞从二氧化碳培养箱中取出,在倒置显微镜下观察细胞生长状况,进行拍照留存于...
鉴定实施例1步骤二得到的人源脐带间充质干细胞外泌体(hucmsc-exosomes):用zetaview进行纳米颗粒跟踪分析(nta)来检测外泌体的粒径和浓度。用透射电镜(tem)观察外泌体的形态。使用bca蛋白检测试剂盒测定分离外泌体的蛋白浓度,从而相对定量外泌体的浓度。通过免疫印迹方法分析cd81、cd63、cd9等外泌体蛋白标记物的表...