摘要:目的探讨人脐带间充质干细胞外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cell exosomes,hUCMSC-Exo)缓解肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)的潜在分子作用机制。方法对hUCMSC-Exo进行提取、鉴定及高通量测序。利用GeneCards搜...
方法:培养人脐带间充质干细胞并采用超滤序贯超离法提取外泌体,通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、蛋白质定量、蛋白质印迹法及蛋白组学分析等技术鉴定。 结果与结论:①提取的外泌体分散度较好且均一,多为杯状圆形或类圆形的膜性小囊泡,可见囊泡的双膜性结构,中央为低电子密度成分,分布较集中且边界清晰;②外泌体粒...
本项目拟采用多种技术对人脐带间充质干细胞及其来源外泌体进行分离、鉴定及保存,并对外泌体进行蛋白质分析,确定外泌体与其母系细胞具有相同或不同的特征,从而明确外泌体源自人脐带间充质干细胞; GO及 KEGG检测结果显示,外泌体具有与其母系细胞相关的免疫特性(低免疫原性),从而证实人脐带间充质干细胞及其来源外泌...
脐带间充质干细胞(HUCMSC)来源的外泌体表现出在创伤修复和组织重建、炎症反应、缺血性疾病等方面丰富的治疗潜能 [4] ,且脐带组织来源丰富、取材较为容易。因此本实验拟对HUCMSC外泌体的提取及鉴定进行研究,以验证HUCMSC可作为外泌体体外大量制备的一种选择方法。资料与方法足月产新生儿脐带均来源于我院,经捐赠者...
本发明涉及一种人脐带间充质干细胞来源的外泌体、鉴定方法及应用。本发明发现,由人脐带间充质干细胞分泌出的外泌体可以被心肌细胞摄取且可以有效改善柯萨奇B3(CVB3)诱导病毒性心肌炎小鼠(VMC)的心脏功能、抑制心肌炎小鼠心脏细胞的凋亡,且可以有效抑制CVB3诱导体外培养人源心肌细胞(HCMs)细胞凋亡。按照本发明,可以实...
摘要 本发明涉及一种人脐带间充质干细胞来源的外泌体、鉴定方法及应用。本发明发现,由人脐带间充质干细胞分泌出的外泌体可以被心肌细胞摄取且可以有效改善柯萨奇B3(CVB3)诱导病毒性心肌炎小鼠(VMC)的心脏功能、抑制心肌炎小鼠心脏细胞的凋亡,且可以有效抑制CVB3诱导体外培养人源心肌细胞(HCMs)细胞凋亡。按照本发明...
目的:分离并鉴定人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSC)分泌的外泌体,研究其对人血的溶血性能。方法:通过超速离心法从脐带干细胞培养上清中分离外泌体,采用蛋白免疫印迹法、透射电镜和纳米颗粒跟踪分析法进行鉴定;制备人红细胞悬液,加入不同浓度外泌体,进行...
目的:探讨人脐带间充质干细胞(HUCMSC)来源外泌体的有效提取方法.方法:通过超速离心法从脐带干细胞培养上清液中分离外泌体,采用蛋白免疫印迹法,透射电镜对提取到的外泌体进行鉴定.结果:分离获得的外泌体特异富集蛋白CD9,TSG101等,透射电镜下可见其呈杯盘状结构,直径约30~100 nm,有完整的膜结构,内含低密度物质....
目的探索分离人脐带间充质干细胞(hUCMSC)来源的外泌体的最佳条件并对其进行生物学鉴定。方法无血清培养法收集外泌体,超高速离心法(ult-exo)和沉淀法分离外泌体(pri-exo),Western Blot检测外泌体标志性蛋白CD63、HSP70、HSP90和阴性对照蛋白TAPA1,透射电...
1、本发明的目的是为了克服现有技术存在的缺点和不足,本发明提供一种无血清体系培养人脐带间充质干细胞来源的外泌体制备和鉴定方法,其制备过程包括以下步骤。 2、步骤一:分离人脐带间充质干细胞(hucmsc)并用无血清培养基培养到p3代;培养的细胞从二氧化碳培养箱中取出,在倒置显微镜下观察细胞生长状况,进行拍照留存于...