考马斯亮蓝G-250分子通过范德华力、疏水作用等次级键与蛋白质中的碱性氨基酸相互作 用,两者互作的结果使G-250分子的最大光吸收从465nm转移至595nm。在一定的蛋白质 浓度范围内,由于G-250与蛋白质结合产物的最大光吸收与蛋白质含量成正比,因此,可 以通过测定G-250和蛋白质结合产物在595nm的最大光吸收来确定蛋...
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)染料,在游离状态下溶液呈棕红色,当它与蛋白质结合后变为蓝色。蛋白质含量在0~1000μg范围内,蛋白质-色素结合物在595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法进行定量分析。考马斯亮蓝G-250法(Bradford法)是比色法与色素法相结合的复合方法,简便快捷,灵...
蛋白质含量测定(考马斯亮蓝G-250法)一、目的 考马斯亮蓝(Coomassie brilliant blue) G-250法是比色法与色素法相结合的复合方法,由Bradford于1976年建立,具有简便快捷,灵敏度高,稳定性好等特点,是一种较好的蛋白质定量测定常用方法。通过本实验学习应用该法测定蛋白质含量的原理,复习分光光度计的使用及标准...
实验三实验三 蛋白质含量的测定蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝考马斯亮蓝 G250 染色法染色法) 原原 理理 考马斯亮蓝 G250 测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝 G250 在游离状态下呈红色,当它与蛋白质结合后变为青色,前者最大光吸收在 465nm,后者在 595nm。在一定蛋白质浓度范围内(0~1000...
它对蛋白质的检测范围通常在1 1000μg/mL之间,对于含量过低或过高的蛋白质样品,可能不太适用。同时,该方法对一些小分子多肽的检测灵敏度相对较低。 总的来说,考马斯亮蓝G250法是一种简便、有效的蛋白质含量测定方法,在科研和实际应用中发挥着重要作用。但在使用过程中,需要充分了解其原理和影响因素,以确保测定...
蛋白质含量在0~1000μg范围内,蛋白质-色素结合物在595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法举行定量分析。考马斯亮蓝G-250法(Bradford 法)是比色法与色素法相结合的复合办法,简便快捷,敏捷度高,稳定性好,是一种较好的蛋白质常用分析办法。
考马斯亮蓝G250染色法测定蛋白质含量原理:考马斯亮蓝G250具有红色和青色两种色调、在酸性溶液中游离状度下为棕红色,当它通过疏水作用与蛋白质结合后,变成蓝色,最大吸收波
考马斯亮蓝染液(ml) 5 5 A595 0.451 0.463 蛋白质含量(μg) 五、数据处理 1、将测得的吸光度填入上表中,并根据数值作出标准曲线。 2、计算公式:样品中的蛋白质含量(μg/g鲜重)={[查得的蛋白质含量(μg)]×稀释倍数}/ [样品鲜重(g)] 六、注意事项 1、如果要求严格,最好在试剂加入后的5~20min内...
实验七考马斯亮蓝G250法测定的蛋白 质含量之邯郸勺丸创作 一、试验目的 1.学习分光光度计的原理及操纵 2.学习利用染色方法提高蛋白质消光系数,以提高分光光度法 检测灵敏度 二、基来源根基理 1.根据物质的吸收光谱进行定性或定量分析的方法称为吸收