考马斯亮蓝G-250分子通过范德华力、疏水作用等次级键与蛋白质中的碱性氨基酸相互作 用,两者互作的结果使G-250分子的最大光吸收从465nm转移至595nm。在一定的蛋白质 浓度范围内,由于G-250与蛋白质结合产物的最大光吸收与蛋白质含量成正比,因此,可 以通过测定G-250和蛋白质结合产物在595nm的最大光吸收来确定蛋...
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)染料,在游离状态下溶液呈棕红色,当它与蛋白质结合后变为蓝色。蛋白质含量在0~1000μg范围内,蛋白质-色素结合物在595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法进行定量分析。考马斯亮蓝G-250法(Bradford法)是比色法与色素法相结合的复合方法,简便快捷,灵...
因此,通过测定595nm处的光吸收值,可以计算出样品中的蛋白质含量。 二、试剂配制 标准蛋白质溶液:通常使用牛血清白蛋白(BSA)作为标准品。例如,可以配制1mg/mL或100μg/mL的BSA溶液作为标准蛋白质溶液。 考马斯亮蓝G-250溶液:称取一定量的考马斯亮蓝G-250(如100mg),溶于适量的90%或95%乙醇中,再加入一定量的...
考马斯亮蓝G - 250( Coomassie briliant blue G - 250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm.后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1-1000ug),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白质含量...
考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。该染料在游离状态下呈红色,在稀酸溶液中当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在465 nm,后者在595 nm。在一定蛋白质浓度范围内(1~1000 mg),蛋白质与色素结合物在595 nm波长下的吸光度与蛋白质含量成正比...
【实验】SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳原理,制胶,跑胶,考马斯亮蓝染色实验操作,测定蛋白质的相对分子质量,,银染法 2046 9 27:19 App BCA蛋白含量测定——保姆级教程 8.2万 365 09:26 App 蛋白质含量测定——凯氏定氮法 9876 1 00:49 App 考马斯亮蓝G250和R250的区别 3629 1 00:52 App 如何3分钟完成考马斯...
【解析】蛋白质所测的OD值一定要位于标准曲线范围内,因为G-250的曲线随着蛋白浓度增高有些略微偏离线性,若蛋白质浓度太高,可适当稀释后再测此外,用于标准样品的牛血清白蛋白组分V最好现配现用,已经配好的溶液即使是-20度保存一段时间后也会造成你的结果偏高 结果一 题目 【题目】考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质...
考马斯亮蓝G250染色法测定蛋白质含量原理:考马斯亮蓝G250具有红色和青色两种色调、在酸性溶液中游离状度下为棕红色,当它通过疏水作用与蛋白质结合后,变成蓝色,最大吸收波
将所得吸光度值代入标准曲线方程中,即可计算出待测样品中蛋白质的含量。 需要注意的是,在使用考马斯亮蓝G250法测定蛋白质含量时,有一些因素可能会对测定结果产生影响。例如,溶液中的盐离子浓度过高可能会干扰蛋白质与染料的结合;某些去污剂的存在也可能影响测定结果;不同蛋白质与考马斯亮蓝G250结合的能力可能有所...