细胞免疫荧光实验通过特异性抗体与细胞内相应抗原结合,再利用荧光标记的二抗进行检测,从而实现对细胞内蛋白的可视化。这一技术在细胞结构与功能研究、疾病机制探索等方面具有重要应用。1.抗体选择 一抗需特异性识别目标蛋白,荧光二抗则要与一抗来源动物种属相匹配。例如,如果一抗是小鼠来源,二抗需是抗小鼠的荧光抗体。
对自发荧光较强的细胞,选择红光激发,发射波长长的荧光素(如APC)可得到较好的S/N比值;对自发荧光比较弱的细胞,发射波长长的荧光素对S/N提高没有明显的改善,可选用FITC。
然后通过直接标记或间接标记方法使用荧光分子指征抗体-抗原结合的位置,以确定目标生物分子在细胞中的位置...
日前,国际顶级权威学术期刊《Nature》专访高新区安徽树突光学科技有限公司(以下简称“树突精密”),深度解析细胞级荧光导引技术,使树突精密成为全球医学界瞩目的焦点。其研制的术中手持显微镜EndoSCell®,是目前全球唯一能实现术中在体细胞级别显影的仪器,曾被央视《新闻联播》聚焦报道。《Nature》杂志发表关于细胞级...
CellROX Orange氧化应激试剂是能够可靠地检测活细胞中的ROS的荧光探针。细胞渗透性CellROX试剂一旦氧化,即可发出明亮荧光。CellROX Orange试剂荧光信号主要位于胞质。 采用传统的荧光显微镜、高内涵成像和分析、微孔板荧光光度计或流式细胞仪测量产生的荧光。染色操作过程极为简单,可将试剂直接加入完全培养基或缓冲液中的细胞...
细胞免疫荧光可以观察蛋白在细胞中的定位,以及一些特殊信号分子蛋白的出核/入核的定位变化。在进行细胞免疫荧光过程中,需要用到细胞爬片,通过将爬片浸在细胞培养基内,细胞在爬片上生长,进而进行细胞的免疫荧光。 实验前准备: 1.胰酶 2.DMEM细胞培养基 3....
图1. 细胞核(蓝色):Hoechst 33342,内质网(绿色):Cell Navigator®Live Cell Endoplasmic Reticulum (ER) Staining Kit *Green Fluorescence*,线粒体(红色):MitoLite™Red FX600。 AAT Bioquest的细胞器特异性染料可用于活细胞和固定细胞成像或流式检测...
细胞器标记物(cell-organelle-marker) 也称作细胞器marker。一般采用某个细胞器或者亚细胞结构的基本组成成分或关键活性蛋白作为细胞器marker,它的存在可以反映该亚细胞结构的位置甚至形状。 通过荧光抗体分别定位靶标蛋白和细胞器标志物蛋白,我们可以判断靶标蛋白的亚细胞定位,同时探究其参与的生物学进程。在细胞器分离提取...
1、细胞免疫荧光步骤方法一:1首先需要把细胞养在玻璃片上(悬浮细胞需要用多聚赖氨酸包 被过的玻璃片)然后在4%PFA里面室温下固定30分钟,PBS洗两次,0.1% TX100室温下作用1 2分钟使细胞膜通透。接下来进行荧光标记,需要在一个大的容器(面积大,扁平状的,比如大的培养皿)里面,放一张用水打湿的滤纸,以保持湿度...