如果你看到的是图1:“眼前的黑不是黑～” 当荧光显微镜下目的荧光几乎没有,或者视野中细胞间仅存在散在的发光点(如图1),一般是免疫荧光无信号,此时我们可以从以下几个方面进行排查: 如果你看到的是图2:“绿色的光闪瞎了眼睛” 免疫荧光中整个细胞片都出现荧光亮点(如图2),一般是由于样本、器皿、成像介质的自发荧光或荧光染料非特异
做免疫荧光第一步就是先准备细胞爬片。很多童鞋发现实验做完,显微镜下一看,细胞也所剩无几了。 这里需要注意,细胞不能太多,连成一片那种细胞很容易在 PBS 漂洗步骤大片脱落。其次细胞也不能太少,这样细胞也会被洗掉,拍照效果不理想。 正常的细胞密度最...
首先,咱们得提提DAPI。这种荧光染料有个特别的本领,它能和DNA紧密结合,所以常用来标记细胞核。在紫外光的激发下,DAPI会发出迷人的蓝色荧光。你看图左边的那一排荧光显微镜图像,蓝色的区域就是细胞核啦! BODIPY:脂质滴的绿色信号 💚 接下来,咱们聊聊BODIPY。这种染料特别适合标记脂质富集的区域,比如脂质滴。在特定波...
当对细胞荧光拍照后,得到的荧光图应该怎么合成一张图片呢,例如下面这3张图,左边是红光染色图,右边是dapi蓝光染细胞核图,下图是合成图: 左图:红光图;右图:dapi蓝光图 merge合成图 操作方法 操作方法很简单,只需要用到Image J软件(或者FIJI)就可以。 FIJI软件和Image 是一样的,FIJI是Image J的新升级版。下面是...
一、流式细胞术的流式通道的概念 主要分为两大类:散射光通道和荧光通道。 流式通道 1.散射光通道 散射光通道包括前向角散射(FSC)和侧向角散射(SSC)。 前向角散射(FSC):反映细胞大小。细胞体积越大,产生的FSC信号越强,有助于初步区分不同大小的细胞。
分享一个冷知识:一张6标7色荧光图,经软件分析可得到100种以上的表型细胞 做完多重荧光免疫组化实验,如果不用软件对其分析,就好像拥有一座宝藏但是没有挖掘工具。 其中仅仅是定量分析,通过软件就可以分析得到100种以上的表型细胞。 多色荧光图像的定量分析 1.提前预设的具体表型细胞 定量与共表达分析不仅可以对每个染...
我们设计合成了一些类“药物一荧光团”复合物，在GFP细胞中，研究硅基罗丹明类荧光探针对细胞内模型药物的荧光成像效果，用于研究药物在细胞内的药效学和药代动力学特征。他们同样发现，药物与SiR-Me连接后，得到的探针Olaparib．SiR-Me(图27，27．1)能够分布于细胞内线粒体中，而与SiR-COOH连接后，得到的探针...
流式图中的颜色为区分不同细胞群而人为指定,与荧光颜色无关。 流式图中的阴/阳(N/P)如何划分? 01、如何做 M1 阴性界限? 实际上,这个 M1 的划分完全是根据阴性 (同型)对照来的。如下图:左图为同型对照,即:您所检测的物质在阴性组中的基础表达量,可以理解为背景、静息状态下、基础水平、未受刺激时等。
图1(B)免疫荧光标注亚细胞结构。绿色代表定位于细胞结构的蛋白质;红色代表微管;蓝色代表DAPI复染的细胞核。 表1 上图中免疫荧光标注的细胞系以及蛋白 ps:文末附Immunoway相应抗体的信息。 本研究绘制了一个全面的基于IF图像的亚细胞蛋白分布图谱——细胞...
荧光显微镜通常具有较高的分辨率，能够清晰地观察细胞和组织的细微结构。此外，荧光显微镜可以在不破坏样本的情况下进行多种颜色的标记和观察，有助于区分不同的组分和结构。然而，荧光显微镜也存在一些缺点，例如样本制备复杂，需要特殊的固定和支持物，以及荧光染料的选择和稳定性等问题。荧光显微镜的技术 荧光显微镜的...