A:将不含细胞的待测溶液孔中加入 10 μL CCK-8 溶液,孵育 1-4 h 后,测定在 450 nm 处的空白吸光度。若测得的吸光度很小,则说明含有较少的还原剂,正式实验可以直接加入 CCK-8 进行检测;若测得的吸光度相对较大,则说明存在较多还原剂,正式实验时需去除培养基,将细胞洗涤两次后,再加入新的培养基和 10...
3、实验组(红色):培养基+细胞+待测样品; 4、白色孔加入100ulPBS或培养基,以缓解蒸发。 空白孔(不含细胞和待测物质的培养基,含有CCK-8) 对照孔(含有细胞的培养基、CCK-8,不含有待测物质) 实验孔(含有细胞的培养基、CCK-8、待测物质) 计算公式: 细胞存活率=[(实验孔-空白孔)/(对照孔-空白孔)]x 100...
10. CCK-8反复冻融会增加背景值,干扰实验测定。 11. 设置实验孔 (含有细胞的培养基、CCK-8、待测物质)阴性对照孔 (含有细胞的培养基、CCK-8、不含待测物质)阳性对照孔(含有细胞的培养基、CCK-8、阳性对照样本)空白孔 (不含细胞和待测物质的培养基、CCK-8) 12. 实验结果计算公式: 细胞存活率=[(实验孔...
1. 种板数:根据你摸索的,或者查阅文献确定你需要的种板浓度。对于细胞增殖实验,每孔加入约1000-2000个细胞100ul;对于细胞毒性实验,每孔加入约5000~10000个细胞100ul。具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小和增殖速度来决定。 2. 种板:以96孔板为例,96孔板横向是1-12的数字,纵向是A-H,可做多个实验组...
CCK-8试剂对细胞的毒性极低,因此部分其他细胞实验(如中性红法或结晶紫法)可在CCK-8法检测完成后继续进行。若处理细胞的药物为小分子且无吸光性,则可直接在450nm波长下测定吸光度。然而,若药物为纳米颗粒等有色吸收物质,为避免干扰,可先将孔板以1000rpm的转速离心3-5分钟,随后取80μl上清液置于新的空白...
🔬 CCK-8细胞毒性实验是生物学研究中常用的方法,用于评估药物或其他因素对细胞活力的影响。以下是实验的详细步骤和原理:1️⃣ 细胞准备:首先,将生长状态良好的细胞进行消化、离心和计数,确保细胞的活力。2️⃣ 铺板:将调整好浓度的细胞悬液均匀铺到96孔板中,每孔约3-5千个细胞,并设置4-6个重复孔。3...
CCK-8法细胞毒性检测步骤: 1、首次做实验时,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK8试剂后的培养时间; 2、接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不等,可以每接种几个孔就混匀一下; 3、悬浮细胞与贴壁细胞相比较难显色。对于悬浮细胞在加入CCK-8培养1-4小时后,可先从...
(1)接种细胞数:针对标准96孔板,贴壁细胞的最小接种量为1000个/孔 (100μl培养基)。若为白细胞,接种量不低于2500个/孔 (100μl培养基)。若使用24孔板或6孔板,应预先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。 (2)在细胞毒性实验中...
🌟 实验器材准备:酶标仪(带450nm滤光片)、移液枪、培养基、CCK-8溶液、二氧化碳培养箱等。🌟 实验步骤: 1⃣️ 制备细胞悬液并进行细胞计数,根据合适的铺板细胞数接种到96孔板中,每孔约100ul细胞悬液。 2⃣️ 向培养板各孔中加入不同浓度的毒性物质,将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5% CO2...
CCK-8检测结果:细胞增殖越多越快,颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。本节视频的课件,有需要可以在福麦斯公众号,回复【细胞增殖】,下载课件的PPT文档!知识 科学科普 cck8实验 cck8数据处理 cck8实验步骤 cck8ic50怎么算 cck8作图 cck8实验步骤细胞毒性 cck8加药量怎么算 cck8数据分析...