实验二:细胞毒性分析 1️⃣ 制备细胞悬液并进行计数。 2️⃣ 在96孔板中接种细胞悬液,每孔约100μl,每个样本可做3个重复。 3️⃣ 将培养板放入培养箱中预培养一段时间(37℃, 5%CO2),细胞贴壁需要大约2-4小时,如果是悬浮细胞,此步骤可省略。 4️⃣ 向培养板各孔中加入不同浓度的毒性物...
1. 细胞种板:首先,用胰酶消化细胞,然后加入10μL台盼蓝和10μL细胞悬液,充分混匀后用细胞计数板计数。将活细胞重悬,按照每孔200μL的体积加入48孔板中,细胞数量根据细胞系不同而有所差异,例如SNU-387和SK-Hep1使用4万细胞,PLC/PRF/5使用2万细胞。加细胞悬液时,先在15ml管中吹匀,然后吸取到1.5ml EP管...
4. 加入CCK-8:悬浮细胞向每孔中加入10μL的CCK-8溶液,由于加入的CCK-8量比较少,可能会因试剂沾在孔壁上而带来误差,(一般把枪头直接插入96孔板的培养液中,全部打进去不松手,枪头从液面下拿出后,再松手)在加完试剂后轻轻晃动培养板以帮助混匀,或者直接配置含10%CCK-8的培养基,以换液的形式加入贴壁细胞中...
1.细胞毒性检测 2.细胞增殖检测 3.细胞活性检测 4.药物筛选 5.微生物对细胞毒性或增殖的测定 二、实验原理 乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)是一种广泛存在于各种生物体中稳定的胞浆酶,正常时不能通过细胞膜,当细胞受损伤或死亡时可释放到细胞外,释放出的LDH 在培养基上清中,可通过偶联酶反应来定量检测。...
一、细胞毒性实验 细胞毒性实验是用于评估化合物或物质对生物体细胞的毒性程度的一种实验方法。Raw264.7细胞可以用于细胞毒性实验，其操作步骤如下：1.制备细胞悬浮液：将Raw264.7细胞接种到96孔板中，培养至80%的密度，用PBS洗涤细胞，加入培养基制备成细胞悬浮液。2.制备化合物或物质处理液：将待测化合物或物质...
🌟 实验步骤: 1⃣️ 制备细胞悬液并进行细胞计数,根据合适的铺板细胞数接种到96孔板中,每孔约100ul细胞悬液。 2⃣️ 向培养板各孔中加入不同浓度的毒性物质,将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5% CO2的条件下)。 3⃣️ 将培养板在培养箱培养至贴壁状态,显微镜下观察。 4⃣️ 每孔各...
细胞增殖毒性实验是评估药物或其他化合物对细胞生长的影响的重要方法。以下是详细的实验步骤: 预实验(仅适用于首次实验的细胞): 收集对数生长期的细胞,根据细胞扩增传代时的生长速度,计算出84小时后汇合度达到100%时的细胞铺板密度,以此作为中心密度,并以1.25倍为梯度,前后各梯度稀释4个密度,接种到实验所用的细胞板...
体外细胞毒性试验的步骤主要包括试验准备、试验方法、结果判定等,每一步骤都有其特定的注意事项,具体如下: 一、试验准备 1.细胞系选择: 选择适当的细胞系,如人类肝细胞、肾细胞、小鼠成纤维细胞或人上皮细胞等,以代表可能与器械接触的目标组织或器官。
MTT细胞毒性实验步骤!。DAY1 1.对前一天培养好的处于对数期的细胞消化、离心 、计数。 2.在96孔板上接种100uL3k-7k/孔的细胞,在37%、5%C02、90%温度条件下培养 24 小时。 DAY2 1. 在显微镜下观察细胞生长状态和密度,取生长状态良好,细胞分布及密度均一的孔进行实验。