细胞培养的具体步骤可分为:细胞复苏、细胞传代、细胞冻存 一、细胞复苏 1. 细胞复苏的原则:快速融化 在复苏细胞时必须遵循快速融化的原则,即必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至 37 ℃,因为这样可使冻存时细胞外的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。 2. 细胞复苏操作
以25 cm2 的培养瓶为例,向瓶内加入 1ml 胰蛋白酶-EDTA(请根据各细胞的指引使用合适的浓度)消化液,轻轻摇动培养瓶,使消化液流遍所有细胞表面,放到 37 ℃ 孵育。通常,几分钟内,会发现胞质回缩、细胞间隙增大,倾斜培养瓶时细胞层能自然流下,此时应加入 2-3ml 含血清的完全培养液终止消化(细胞解离所需时间请参...
以25 cm2 的培养瓶为例,向瓶内加入 1ml 胰蛋白酶-EDTA(请根据各细胞的指引使用合适的浓度)消化液,轻轻摇动培养瓶,使消化液流遍所有细胞表面,放到 37 ℃ 孵育。通常,几分钟内,会发现胞质回缩、细胞间隙增大,倾斜培养瓶时细胞层能自然流下,此时应加入 2-3ml 含血清的完全培养液终止消化(细胞解离所需时间请参...
比例传代:取离心管弃去上清液,补加2ml培养基后吹打均匀,轻晃离心管将细胞悬液按1:2的比例分到新的培养基中,“8”字或米字摇晃培养皿使细胞均匀铺平。 培养细胞:将培养皿置于显微镜下观察情况,37℃培养过夜。 三、细胞冻存 ❄️ 配置冻存液:90%血清(10% FBS)+10% DMSO。 冻存准备:冻存盒提前复温,按...
细胞培养其实就三个步骤:细胞复苏、细胞传代和细胞冻存。听起来是不是很简单?但其实每一步都有讲究。 细胞复苏 🌡️ 首先,我们要把冷冻的细胞复苏。这个过程就像是把冬眠的细胞唤醒。你需要把冷冻的细胞放到一个特定的培养液里,然后在37度的恒温箱里慢慢唤醒它们。这个步骤很关键,因为细胞刚从冷冻状态醒来,...
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代。①弃去培养上清，用PBS或盐水清洗1-2次；②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱...
细胞培养是指将细胞从动物或植物体内取出，然后在适宜的人工环境中生长的过程。细胞可以在培养前直接从组织中取出并通过酶或机械方法进行解离，也可以来源于已建立的细胞系或细胞株。细胞培养又具体分为细胞传代、换液、冻存、复苏等一系列过程，每个步骤都对应着不同的操作技术要点，想要养好细胞，每一步都必须掌握...
细胞培养，这一将细胞从动物或植物体内取出并在人工环境中促进其生长的过程，涵盖了众多关键步骤。在培养前，细胞可直接从组织中取出，经过酶或机械解离，或源自已建立的细胞系或细胞株。这一过程进一步细分为细胞传代、换液、冻存以及复苏等环节，每一环节都需掌握特定的操作技术要点，以确保细胞的健康生长与顺利培养...
🌊 细胞复苏 从冷冻保存中取出细胞,迅速放入37°C水浴中解冻。 解冻后,将细胞转移到含有新鲜培养基的培养皿中。 轻轻摇动培养皿,使细胞均匀分布。 放入37°C、5%CO2的培养箱中培养。❄️ 细胞冻存 当细胞状态良好时,可以进行冻存。 将细胞转移到离心管中,离心后弃上清。
在细胞培养中,常见的术语有原代培养、传代培养、冻存和复苏。 原代培养 原代培养是将从组织中分离出的细胞直接进行培养,即首次培养。通常将组织切割成小段或分散成单细胞悬液,加入培养基中,使其中的细胞粘附在培养基表面上生长。原代培养中所得细胞经常受到组织来源、细胞类型和培养条件等因素的影响,因此可能表现出...