细胞凋亡一般由生理或病理性因素引起。而细胞坏死则主要为缺氧(hypoxia)造成,两者可以很容易通过观察区分开来。在细胞凋亡过程中,细胞缩小,DNA被核酸内切酶降解成180bp-200bp片段属于有层次之断裂(可以通过凝胶电泳证明),而细胞坏死时,细胞肿胀,细胞膜被破坏,通透性改变。细胞器散落到细胞间质,需要巨噬细胞去清除,结果...
可将二者区分开的方法:琼脂糖凝胶电泳,形态学观察(透射电镜是是区分凋亡和坏死最可靠的方法),Hoechst33342/PI双染色法流式细胞仪检测,AnnexinV/PI双染色法流式细胞仪检测等。 不能将二者区分开的方法:原位末端标记法、PI单染色法流式细胞仪检测等。 三、样品来源不同选择 组织:主要用形态学方法(HE染色,透射电镜...
在流式细胞仪或荧光显微镜下观察，早期凋亡细胞由于细胞膜完整，PI无法进入，仅显示Annexin V-FITC的绿色荧光；而凋亡晚期或者坏死细胞由于细胞膜通透性增加，PI可以进入并与细胞核结合，同时Annexin V-FITC也能结合外翻的PS，因此这些细胞会同时显示绿色和红色荧光。了解完Annexin V细胞凋亡实验原理后，下面我们一起看一...
细胞凋亡检测有很多种方法：根据凋亡细胞固有的形态特征，利用光学显微镜、激光扫描共聚焦显微镜和透射电子显微镜等观察细胞形态；根据细胞凋亡过程中不同时期的变化检测是否发生凋亡，常见的有Caspase活性检测、Annexin V检测、线粒体膜电位检测、TUNEL检测等。细胞发生凋亡时，不同时期在不同区域（如细胞膜、细胞浆、线粒...
细胞凋亡在维持生物体内细胞数量的动态平衡、清除异常细胞以及抵御病原体入侵等方面发挥着至关重要的作用。本研究旨在通过实验方法检测细胞凋亡的发生,探讨细胞凋亡在特定条件下的生物学意义。 二、实验目的 1. 探讨细胞凋亡在特定条件下的发生机制。 2. 检测细胞凋亡的发生,并分析其与细胞增殖的关系。 3. 研究细胞...
1. 细胞:人肝癌细胞株HepG2,人正常肝细胞株LO2。 2. 试剂:Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒,Caspase-3活性检测试剂盒,DNA ladder检测试剂盒,荧光显微镜,流式细胞仪等。 3. 仪器:CO2培养箱,细胞培养瓶,移液器,离心机,荧光显微镜,流式细胞仪等。 三、实验方法 1. 细胞培养:将HepG2和LO2细胞分别接种于...
本实验旨在探究细胞凋亡的主要途径,包括内源性线粒体途径和外源性死亡受体途径,以及相关的分子机制和检测方法。 二、实验原理 (一)内源性线粒体途径 细胞在受到内部或外部应激信号刺激时,线粒体外膜通透性发生改变,导致细胞色素C等凋亡因子释放到细胞质中。细胞色素C与凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)结合形成凋亡小体...
01实验原理 Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与磷脂酰丝氨酸（PS）高亲和力特异性结合。在细胞凋亡早期，只分布在正常细胞膜脂质双层内侧的磷脂酰丝氨酸（PS）翻向外侧，用标记了荧光素的Annexin V作为荧光探针，并搭配PI、7-AAD、DAPI等核酸染料使用，能够准确区分正常细胞、凋亡早期和...
内源性途径主要依赖线粒体的变化,而外源性途径通过死亡受体激活起始凋亡信号。两种途径最终都通过激活下游的caspase级联反应导致细胞凋亡,但在具体的分子机制和调控过程上存在差异。 本实验通过对细胞凋亡不同途径的研究,为进一步理解细胞凋亡的复杂机制以及相关疾病的发生发展提供了一定的实验依据。然而,细胞凋亡是一个受到...
本实验旨在探究细胞凋亡的分子机制,通过检测细胞凋亡相关分子表达的变化,揭示细胞凋亡的调控途径。 二、实验材料与仪器 1. 材料: (1)细胞:人正常细胞系(如HEK293T细胞)、癌细胞系(如A549细胞); (2)细胞凋亡检测试剂盒; (3)DNA提取试剂盒; (4)实时荧光定量PCR试剂盒; (5)蛋白质提取试剂盒; (6)Western ...