1. 在红色荧光对兰色荧光散点图上,还可见到细胞凋亡区向细胞坏死区迁移的轨迹,可能是凋亡细胞的DNA进一步降解的缘故。2. 用Heochst 33342染料与细胞孵育的时间不宜过长,一般控制在20min之内为宜。如果太长可引起Heochst 33342的发射光谱由蓝光向红光的迁移,导致红色荧光与兰色荧光的比例改变,从而影响结果的判断。
实验原理 细胞凋亡时,在细胞、亚细胞和分子水平上会发生的特征性改变,这些改变包括细胞核的改变,细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞的改变最具特征性。通过流式细胞仪检测这些特征性…
细胞凋亡检测,细胞凋亡实验步骤,检测方法 一、定性和定量研究只定性的研究方法:常规琼脂糖凝胶电泳、脉冲场倒转琼脂糖凝胶电泳、形态学观察普通光学显微镜、透射电镜、荧光显微镜进行定量或半定量的研究方法:各种流式细胞仪方法、原位末端标记法、ELISA定量琼脂糖凝胶电泳; 二、区分凋亡和坏死可将二者区分开的方法:琼脂糖...
在形态上可见凋亡细胞与周围细胞脱离接触细胞变园细胞膜向内皱缩胞浆浓缩内质网扩张细胞核固缩破裂呈团块状或新月状分布内质网和细胞膜进一步融合将细胞分成多个完整包裹的凋亡小体凋亡小体最后被吞噬细胞吞噬消化 细胞凋亡技术实验详细步骤 一、实验目的 1、掌屋凋亡细胞的形态特征 2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来...
细胞凋亡检测细胞凋亡实验步骤检测⽅法 细胞凋亡检测，细胞凋亡实验步骤，检测⽅法 ⼀、定性和定量研究 只定性的研究⽅法：常规琼脂糖凝胶电泳、脉冲场倒转琼脂糖凝胶电泳、形态学观察（普通光学显微镜、透射电镜、荧光显微镜）进⾏定量或半定量的研究⽅法：各种流式细胞仪⽅法、原位末端标记法、ELISA 定量...
阴性对照组细胞状态良好,呈正常的梭形,背景清晰。实验组部分细胞萎缩变圆,胞膜开始改变。阳性对照组细胞失去正常形态,变圆萎缩,并出现大量的凋亡小体。在光学显微镜下,结合 3 组结果分析,经过 DAB 和苏木素复染后,凋亡细胞核被染成棕黄色,正常细胞核呈蓝色。可通过实验组凋亡细胞数判断凋亡水平。0...
1. 细胞培养和处理 在进行细胞凋亡检测实验前,首先需要培养和处理细胞。选择适当的细胞系,如癌细胞系或原代细胞,根据实验的需要进行培养。细胞培养需要一定的细胞培养基和条件,如培养皿、培养箱、无菌操作等。在培养过程中,需要注意细胞的生长状态和数量,以及培养基的更换和细胞的传代。
01实验原理 Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，能与磷脂酰丝氨酸（PS）高亲和力特异性结合。在细胞凋亡早期，只分布在正常细胞膜脂质双层内侧的磷脂酰丝氨酸（PS）翻向外侧，用标记了荧光素的Annexin V作为荧光探针，并搭配PI、7-AAD、DAPI等核酸染料使用，能够准确区分正常细胞、凋亡早期和...
一、操作步骤(贴壁细胞为例) 1.1对照管的设置 1)空白管:诱导凋亡的细胞不加染料,用来调节电压; 2)单染管:分别需要只加PI和荧光标记的Annexin V两个单染管,用来调节补偿; 3)实验管:诱导凋亡的细胞加本次实验的所有荧光染料; 4)阴性管:正常培养细胞加入染料,确认细胞正常状态,排除假阳性 ...
1.收集细胞并进行计数，每组取1×106个细胞，300×g离心5min，弃上清。注：若样本为贴壁细胞，凋亡细胞会有部分悬浮于上清中，上清中的细胞也要收集。2.加入200μLPBS（含1%BSA）重悬细胞，加入200uL Fixation Buffer，室温固定60min（推荐使用摇转方式，或每15min 混匀一次）。3.加入1mL PBS（含1%BSA），...