PGC-1α)和腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)是评价线粒体功能的主要调控因子,AMPK能促进PGC-1α的激活,进而调控线粒体自噬、凋亡及炎症反应的发生[10],对维持细胞稳态和肠黏膜屏障功能有关键...
TUNEL和Annexin V-FITC实验显示,缺氧可刺激细胞凋亡(图2c, e,g). JC-1是一种理想的荧光探针,广泛用于检测线粒体膜电位(线粒体be potential) ΔΨm。jc-1由红色荧光转变为绿色是一个早期凋亡指标,表明缺氧可以通过降低ΔѰM削弱线粒体的生物能作用(图2f)。 图一HIF-1α在人和小鼠膝关节软骨中增加。a正...
1)小鼠模型(6周龄C57BL/6JN雌鼠,20 mg/kg丙泊酚腹腔注射4周); 2)线粒体功能检测(JC-1膜电位探针、MitoTracker荧光染色); 3)分子互作验证(重组TGF-β1挽救实验); 4)多维度卵巢功能评估(AMH ELISA、卵泡计数、FSHR/CYP19A1免疫组化)。 【Impact of propofol on ovarian function and cell apoptosis in fe...
这些效应被线粒体自噬抑制剂Mdivi-1和SIRT1抑制剂EX-527完全逆转,证实该通路的核心调控作用。 关键技术方法 研究采用MCAO手术构建CIRI小鼠模型,通过TTC染色定量梗死面积;建立HT22细胞OGD/R模型模拟缺血再灌注,CCK-8检测细胞活力,流式细胞术分析凋亡率;JC-1荧光探针监测MMP,MitoSOX™ Red标记mtROS;Western blot检测...
2.4.2ABPS对IL-1β处理髓核细胞增殖、氧化应激、NLRP3炎性小体活化和线粒体自噬的影响将细胞分为对照组、IL-1β组、ABPS(100 mg/L)+IL-1β组、ABPS(200 mg/L)+IL-1β组,除对照组外,其余各组均用10 ng/mL的IL-1β...
(1)线粒体膜电位(MMP)检测 目前常采用荧光染料探针方法结合流式细胞术来检测线粒体膜电位。常用罗丹明123(Rhod123)、四甲基罗丹明甲酯(TMRM)、四甲基罗丹明乙酯(TMRE)和四氯四乙基苯并咪唑羰花菁碘化物(JC-1)等亲脂阳离子荧光染料 (2)线粒体膜通透性转换孔(MPTP)检测 MPTP是线粒体渗透转换功能的结构基础...
检测指标应包括线粒体膜电位变化、LC3-II/LC3-I比值、PINK1/Parkin通路激活情况。建议同时使用MitoTrackerRed染色观察线粒体形态变化，配合透射电镜观察自噬体形成。Westernblot检测时需设置β-actin内参，每孔上样蛋白量控制在20-30μg。流式细胞术分析建议收集1×10^6个细胞，使用JC-1染料检测膜电位变化。注意事项...
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为进一步探究细胞凋亡在顺铂致肠黏膜损伤的作用,通过JC-1染色以及流式细胞术检测顺铂诱导的IEC-6细胞凋亡情况,结果见图7-A、B,与对照组比较,顺铂组线粒体细胞膜电位显著降低(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01);与顺铂组比较,人参皂苷Rh4各剂量组线粒体细胞膜电位显著升高(P<0.05、0.01),细胞凋亡率显著降低...