感受态专题：真核细胞的转染实验步骤 1. 在6孔板中接种1~3×105细胞/孔，加入2ml完全培养基，置CO2孵箱中37℃培养过夜。2. 待细胞长到50-80%单层时，在无菌离心管中配置如下溶液：i. 溶液A：将4?g待转染的超纯DNA稀释到250?l无血清培养基中，静置5min ii. 溶液B：将2-25?l LipofectAMINE 稀释到...
进行真核转染的一般程序: 克隆目的基因(经测序验证)-准备真核表达载体-将目的基因插入表达载体中-转染-筛选-鉴定 下面以pcDNA3为载体,p16为目的基因,介绍真核转染的实验操作。 一、试剂准备 1、HBS(Hepes-buffered saline):876mg NaCl溶于90ml ddH2O,加入1M Hepes,调pH到7.4,补ddH2O至100ml, pH7.4,滤过除菌。
进行真核转染的一般程序: 克隆目的基因(经测序验证)-准备真核表达载体-将目的基因插入表达载体中-转染-筛选-鉴定 下面以pcDNA3为载体,p16为目的基因,介绍真核转染的实验操作。 一、试剂准备 1、HBS(Hepes-buffered saline):876mg NaCl溶于90ml ddH2O,加入1M Hepes,调pH到7.4,补ddH2O至100ml, pH7.4,滤过除菌。
进行真核转染的一般程序: 克隆目的基因(经测序验证)-准备真核表达载体-将目的基因插入表达载体中-转染-筛选-鉴定下面以pcDNA3为载体,p16为目的基因,介绍真核转染的实验操作。 一、试剂准备 1、HBS(Hepes-buffered saline):876mg NaCl溶于90ml ddH2O,加入1M Hepes,调pH到7.4,补ddH2O至100ml,pH7.4,滤过除菌。
产品名称 普利莱 DOTAP真核细胞转染试剂 产品规格 0.25ml 用途范围 科研实验研究 是否进口 否 储存条件 4℃ 保质期 12个月 是否现货 是 产地 中国 供货数量 100000 产品LOGO APPLYGEN 可售卖地 全国 型号 C1510-0.25 货号 C1510-0.25 价格说明 价格:商品在爱采购的展示标价,具体的成交价格可能因...
电穿孔法作为一种物理转染方法，通过施加短暂的高压电脉冲，在细胞膜上形成瞬时微孔，使带电荷的分子如DNA、RNA等能够进入细胞内。与其他转染方法相比，电穿孔法具有操作简便、适用范围广、转染效率高等优点。本研究旨在通过优化电穿孔参数，使用线性多核苷酸作为载体，增强真核细胞的转染效率和效果，为基因治疗、疫苗开发...
当脂质体 - 核酸复合物与真核细胞接触时，主要通过以下几种方式实现基因转染：一是脂质体与细胞膜直接融合，将复合物中的核酸释放到细胞质中；二是通过细胞的内吞作用，复合物被摄入细胞内形成内体，然后在内体酸性环境的作用下，脂质体与内体膜融合，释放核酸到细胞质中，再进一步转运到细胞核内进行转录和翻译。三...
质粒dna转染真核包主要有以下两种方法：一、生化方法 1.磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞 1）转染前 24 h，通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以1×105至4×105细胞 /cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养皿或12孔板上。于含 5%～7% CO2的37℃温箱孵育20 ～24 h。转染前1 h换液。2） 按照下属方法...
真核细胞转染实验的目的主要是将外源核酸(DNA或RNA)导入真核细胞中,以改变细胞的遗传特性或研究基因表达。具体来说,可以分为基因表达和基因抑制两大方面。一方面,通过使用质粒载体或mRNA在培养细胞中表达目的蛋白,或利用转染技术生成经过适当折叠和翻译后修饰的重组蛋白。另一方面,通过RNA干扰(RNAi)技术抑制特定蛋白质的...