电泳现象即指带电的胶体颗粒在电场中可以向电荷相反的电极移动的现象。由于蛋白质颗粒上带有电荷,因此在电场中能移动。移动的速度和方向主要决定于蛋白质分子上所带电荷的正负性,电荷数目以及颗粒大小等。由于各种蛋白质的等电点不同和颗粒大小各不相同,在同-pH条件下各具不同的带电性,在电场中移动的方向和速度...
电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其含量(%)的方法。方法分类 纸电泳法 操作法 (1) 电泳缓冲...
电泳方法指利用电泳现象对某些化学组分进行分离分析或分离制备的技术方法。电泳现象指在蛋白质、核酸以及氨基酸、核苷酸、生物碱、有机酸、甚至无机离子等溶液中,带电微粒由于受直流电场的作用而向电极移动所发生的相对于溶剂的运动。近几年来,电泳已成为各类化学分析和制备的基本技术之一,广泛应用于生物化学、药物化学...
1.连续pH电泳 电泳的全部过程中缓冲液pH保持不变。如纸电泳、醋酸纤维素膜电泳。 2.非连续pH电泳 缓冲液和支持物间有不同的pH,如聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳、等速电泳等。 醋酸纤维素薄膜电泳 醋酸纤维素薄膜电泳是以醋酸纤维素薄膜为支持物,它是纤维素的醋酸酯,由纤维素的羟基经乙酰化而制成。醋酸纤维...
毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)又称高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容,它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平,并使单细胞分析,乃至单分子分析成为可能。长...
■ 电泳用buffer作用 电泳用buffer是一种具有缓冲能力的离子溶液,它的主要作用是: ①在电泳过程中,维持溶液的pH稳定。 ②使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移。 ■电泳用buffer优缺点 实验室中常见的核酸电泳缓冲液主要是TAE(Tris-Acetate-EDTA)和TBE(Tris-Borate-EDTA)这两种,两者的区别是: ...
脉冲场凝胶电泳可以用来分离大小从10kb到10Mb的DNA分子。制备加工 1.收集10ml全血,加入30ml细胞裂解液。置冰浴中至少20min直至红细胞完全溶解。2.2000r/min离心10min,移去红色上清液,再次用细胞裂解液洗涤细胞,然后用PBS重悬细胞。3.稀释单细胞悬液并取一小份用Neubauer腔计数细胞。4.用PBS重悬细胞,以达到40...
电泳( Electrophoresis ),在电场力作用下,带电粒子在流体中移动的现象。应用这一现象分离、鉴定或制备氨基酸、蛋白质、核酸、无机离子、病毒颗粒以及活细胞的方法,称电泳技术。电泳技术广泛应用于生物化学工业、临床医学检验、分子生物学、农业育种和作物、畜禽代谢研究。