1. 平板式电泳 电泳支持物(如凝胶)制成水平板状。 2. 垂直板式电泳 板状支持物,在电泳时,按垂直方向进行。 3.连续—流动电泳 首先应用于纸电泳,将滤纸垂直竖立,两边各放一电极,缓冲液和样品自顶端下流,与电泳方向垂直。也可以用其它材料作支持物。该法主要用途是制备一定量的电泳纯物质。 4.圆盘电泳 电泳支...
加完样后,合上电泳槽盖,立即接通电源。控制电压保持在60-80V,电流在40mA以上。当溴酚蓝条带移动到距凝胶前沿约2cm时,停止电泳。 染色 未加EB的胶板在电泳完毕后移入0.5μg/ml 的EB 溶液中,室温下染色20-25 分钟。 观察和拍照 在波长为254nm 的长波长紫外灯下观察...
可能的原因:1.琼脂糖胶制作时溶胶不完全以致琼脂糖颗粒残留不均匀、有污染或琼脂糖质量不好;2.制胶过程中破坏了点样孔;3.移胶过程使胶孔偏移;4.电压太高,通常情况下电压越低,走出的电泳条带越平整。低电压电泳时,电泳缓冲液也不容易发烫,也能确保在电泳的过程中凝胶不会变形。当然电压太低,等待电泳结果的时...
探讨凝胶电泳实验中7个疑难问题 1 凝胶电泳中DNA 分子的移动方向 1.1 问题来源 教材P.84提到:DNA分子具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下,这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动[1]。但教材中并未...
实验用品(溶液配制说明详见文章下方)蛋白样品,SDS-PAGE loading buffer,PBS,Tris-Hcl (PH 8.8), Tris-Hcl (PH 6.8) ,30%丙烯酰胺,10%SDS,10%过硫酸,5×SDS-PAGE电泳缓冲液,考马斯亮蓝R-250染色液,脱色液。实验步骤一、凝胶配置1.分离胶的配制(1)找出配套的胶板,用擦镜纸擦干净,并固定...
1. 实验结果表明,Fe(OH)3胶体粒子在电场中带正电荷,向阳极方向移动。 2. 电泳实验中,NaCl溶液的作用是形成电场,使胶体粒子发生移动。 3. 在实验过程中,胶体粒子在电场中的运动速度受到多种因素的影响,如电场强度、粒子大小、介质粘度等。 4. 实验结果表明,Fe(OH)3胶体粒子在电场中的运动速度与时间呈正相关,...
往期文章:SDS-PAGE蛋白电泳实验总结(1)SDS-PAGE蛋白电泳实验总结(2) 文章目录: 前置知识 配胶流程 SDS连续电泳缓冲液配方 SDS非连续电泳缓冲液配方 配好胶,电泳成功了一半 前置知识:SDS-PAGE电泳的凝胶主要分为浓缩胶和分离胶。 ●浓缩胶:又称堆积胶,特点是凝胶浓度小、凝胶孔径较大。样品在浓缩胶上,会因为大...
将电泳槽放入电泳仪中,使加样孔一端靠近负极。 接通电源,设置合适的电压和电泳时间(一般为1 2V/cm,电泳时间根据DNA大小和电泳槽的长度而定)。 4、观察结果 电泳结束后,将凝胶小心取出,放入紫外透射仪中观察。 在紫外光下,DNA条带会发出荧光,可以拍照记录或直接观察分析。 五、实验结果与分析 1、结果观察 在紫...
一、实验目的 掌握蛋白类药物SDS-PAGE法检测分子量和纯度的原理和方法。 二、实验原理 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS-PAGE),也叫变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种含有蛋白变性剂SDS(十二烷基硫酸钠)的常用电泳技术,常用于检测蛋白质。