只能检测晚期凋亡DNA发生断裂的细胞,检测凋亡不多。 绿点表示未染色的细胞和红色表示TUNEL染色的细胞。 二、流式细胞术检测细胞因子 Cytometric Bead Array (CBA) :即微量样本多重蛋白定量技术,是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法,能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。如细胞培养液中细胞因子含量的...
流式细胞仪检测细胞需要细胞活性好、单个分散,这样才方便实验过程中区分死亡、凋亡和正常细胞。组织在冻存解冻后会有大量细胞死亡、细胞活性下降、粘连破碎等问题,无法再上机检测。流式检测最好是用新鲜的刚取材的样本进行检测,数据准确,操作方便。 2 流式和 Tunel 染...
手把手教学|流式细胞术如何检测细胞周期和凋亡#手把手教学 #流式细胞技术 #检测细胞 #细胞实验 #实验外包 - eRebri医瑞贝-小H于20240904发布在抖音,已经收获了7个喜欢,来抖音,记录美好生活!
细胞凋亡(apoptosis)是由基因调控的细胞程序性死亡的过程。凋亡细胞形态上表现出细胞核皱缩,细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻线粒体膜电位下降,染色质凝缩和DNA断裂等 实验原理 流式检测细胞凋亡常用FITC-Annexin V/PI检测试剂盒。在细胞凋亡早期PS外翻到细胞膜表面。Annexin-V是一种钙离子依赖的磷脂结合蛋白,它对PS具有较高的...
四、基于流式细胞术的凋亡检测手段 PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测 PS从细胞膜内侧转移到外侧在细胞受到凋亡诱导后不久发生, 可能作为免疫系统的识别标志。AnnexinV,一个钙依赖性的磷脂结合蛋白,能专一性的结合暴露在膜外侧的PS,再通过简单的显色或发光系统进行检测。由于这是一种凋亡早期的活细胞检测(悬浮细...
流式细胞术检测细胞凋亡(FITC-PI) 1实验方法 1.用6孔板培养细胞,待细胞生长达到60%-70%,吸出旧培养基,根据实验需求处理,继续培养。 2.根据实验处理时间,把细胞培养液吸出至一合适离心管内,PBS洗涤贴壁细胞一次,加入适量胰酶细胞消化液消化细胞。室温孵育至轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶细胞消化液。
通过使用荧光标记的Annexin V(如Annexin V-FITC)与PI的联合染色,可以在流式细胞仪上同时检测PS的外翻和细胞膜的完整性,从而区分活细胞、早期凋亡细胞、中晚期凋亡细胞和坏死细胞。 1.材料 肿瘤细胞系、FALCON 管、EP管、吸头、移液器和400目滤网,胰酶、1XPBS、凋亡试剂盒 ...
流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术,它是集激光技术、光电测量技术、计算机技术、流体力学以及细胞免疫荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技细胞分析技术。流式细胞仪是应用流式细胞术建立起来的仪器装置。在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)分布于细胞膜...
流式细胞术检测细胞凋亡（AnnexinV-FITC/PI双染法）一、原理 在正常的活细胞，磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在凋亡的细胞，PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力...