在IP实验中,抗体需要通过识别抗原的构象表位并与靶蛋白结合沉淀出来,而只能识别线性表位的抗体则无法做到这一点。所以开始IP实验之前,一定要先确定所选抗体适用于IP实验。 IP和WB在抗体稀释比上有不同,IP实验中抗体所需要的稀释比例比WB实验要小的多,一般情况下抗体和靶蛋白的比例要控制在1:10到1:100之间。如果抗...
染色质免疫沉淀(ChIP)实验通过组蛋白修饰(表观遗传学)或转录因子-DNA 结合相互作用,监测转录调控,识别基因组和蛋白质组之间的联系。ChIP 实验的优势在于能够捕捉系统中特定蛋白质-DNA 相互作用,并使用定量聚合酶链反应(qPCR)对相互作用进行量化。染色质免疫...
anti-cMyc在第二、第三条泳带都有,而anti-GFP只有第三条带有蛋白,由此推测实验组的实验操作为利用anti-cMyc进行沉淀实验,在利用IB检测GFP-CAT3的存在。 从实验组第三条带可以发现当cMyc-CPK8蛋白被沉淀下来时GFP-CAT3蛋白也会被共沉淀下来,由此得到结论:cMyc-CPK8蛋白与GFP-CAT3蛋白存在相互作用。 四、Co...
当溶液中离子的浓度乘积大于溶解度积时,难溶电解质将开始沉淀;当溶液中离子的浓度乘积小于溶解度积时,沉淀将溶解。 三、实验材料与仪器 1. 实验材料: - 氯化钠溶液 - 硫酸铜溶液 - 氢氧化钠溶液 - 硫酸铝溶液 - 硫酸铁溶液 - 硝酸银溶液 - 硝酸铅溶液 - 氯化银溶液 - 氢氧化铁溶液 - 硫酸钡溶液 - 硫酸...
下面是一种常见的沉淀反应实验流程: 实验步骤: 1.准备试剂:根据实验需要,准备好待反应的溶液和反应所需的试剂,如硝酸银、氯化钠等。 2.取样:使用已知浓度的试剂,取一定量待测样品溶液加入试管或烧杯中。 3.加试剂:向样品溶液中加入反应试剂,例如向硝酸银溶液中加入氯化钠。 4.观察反应:观察反应溶液是否出现混浊...
细胞免疫共沉淀实验(Co-IP)是一种研究细胞内蛋白质相互作用的重要方法。其基本原理是,如果细胞内两种蛋白质(A和B)有直接或间接的相互作用,那么在温和的裂解条件下获得的蛋白样品中加入A蛋白的抗体,可以将A蛋白沉淀下来,与其直接或间接相互作用的B蛋白或C蛋白也会一起被沉淀下来。通过Western blot检测沉淀中是否存在...
🔬 免疫共沉淀(Co-IP)简介: 免疫共沉淀是一种利用抗体与抗原之间的特异性免疫反应来研究蛋白质间相互作用的方法。🔍 基本原理: 在细胞裂解液中加入抗原特异性抗体,通过免疫沉淀反应形成免疫复合物。经过纯化、洗脱后,可以通过SDS-PAGE电泳、Western blot或质谱鉴定出与抗原相互作用的蛋白质。🌈...
免疫沉淀(Immunoprecipitation ,IP )是利用抗体抗原特性性结合的一种亲和纯化技术,广泛应用于从组织或细胞裂解物中富集、分离天然靶蛋白。实验过程 注意:操作样品尽量冰上或4℃进行。1.样品准备 1) 可选择与您研究材料相匹配的标准操作流程进行细胞裂解。Tip 1:高浓度的去垢剂会干扰免疫沉淀效果。所以可先用小...
这一实验原理常用于分离和确定溶液中的微量金属离子、沉淀颗粒的成分等。 沉淀实验的步骤一般包括以下几个方面:首先是选择合适的沉淀试剂。根据需要分离和提取的物质的性质,选择适当的沉淀试剂,例如常用的氯化钡、氯化银等。 接下来是将试剂加入待检测的溶液中。在加入试剂的同时要搅拌均匀,以确保试剂与溶液充分接触。