anti-cMyc在第二、第三条泳带都有,而anti-GFP只有第三条带有蛋白,由此推测实验组的实验操作为利用anti-cMyc进行沉淀实验,在利用IB检测GFP-CAT3的存在。 从实验组第三条带可以发现当cMyc-CPK8蛋白被沉淀下来时GFP-CAT3蛋白也会被共沉淀下来,由此得到结论:cMyc-CPK8蛋白与GFP-CAT3蛋白存在相互作用。 四、Co...
·IP操作:特异性抗体的选择和洗涤步骤的彻底性对实验结果的纯度影响重大。 ·RNA提取与反转录:充分相分离确保RNA纯度,反转录反应条件优化以提高cDNA质量。 结果验证与分析 · 通过qPCR定量分析,选择特异性高的引物对目标RNA进行定量,确保实验数据的准确性和可靠性。 · 实验应至少重复三次,并进行统计分析以保证结果的...
1.样品准备 1) 可选择与您研究材料相匹配的标准操作流程进行细胞裂解。Tip 1：高浓度的去垢剂会干扰免疫沉淀效果。所以可先用小体积RIPA（Cat No. PR20001）裂 解细胞制备蛋白裂解物，在开始IP捕获前，再补加1 X PBS（Cat No. PR20023）或孵育 液稀释到需要的体积。Tip 2：使用足量的蛋白裂解物：单管IP...
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-清洗工作台和实验用具,确保无杂质和污染。 2.沉淀物的收集 -提取含有沉淀物的溶液,可通过离心、沉淀、沉淀沉淀等方法进行。 -使用玻璃棒或玻璃滤器将沉淀物转移到干净的烧杯或容器中。 3.洗涤沉淀 -在收集沉淀的容器中添加适量的去离子水,轻轻搅拌使沉淀重新悬浮。 -等待较大颗粒的沉淀下沉,将上层清液倒掉,重复...
实验操作步骤如下: Step 1:样本处理——贴壁细胞、悬浮细胞、动物组织、植物组织 1.1、贴壁培养细胞和悬浮培养细胞可以直接进入下一步Step 2,无需额外处理; 1.2、植物组织和动物组织都需要在冰上置于干净培养皿中迅速用小剪刀将组织剪碎、切割成毫米级的小碎块,并转入50mL离心管中待用; ...
染色质免疫沉淀(ChIP)实验旨在通过特异性抗体识别和结合目标蛋白(如转录因子HIF1A),从而共沉淀出与其互作的DNA。通过后续的DNA提纯和qPCR分析,验证目标转录因子是否与特定DNA序列 (如启动子区域)结合,及其结合位置,为研究蛋白-DNA相互作用提供实验依据。 实验原理 ...
首先,根据实验要求,将试样和试剂按比例加入容器中,充分搅拌混合。然后,待固体颗粒沉淀后,使用适当的沉淀法仪器(如离心机、滤纸等)进行分离。在整个操作过程中,应注意保持容器的稳定和操作环境的洁净,避免外界干扰和样品污染。 4.仪器使用后的清洁和维护:实验结束后,应及时清洁和维护沉淀法仪器。清洗时要使用合适的...
实验操作如下: 1.取一定量的未知溶液,加入硝酸钙溶液,观察是否出现白色沉淀。 2.若出现白色沉淀,可进一步确认其为碳酸根离子沉淀。加入醋酸溶液,若白色沉淀溶解,则确认为碳酸钙。 3.若要进一步确认,可加入盐酸溶液,观察是否释放出二氧化碳气体。 二、氢氧根离子(OH-) 氢氧根离子可与多种金属离子产生沉淀反应,其中最...
免疫共沉淀实验流程 该免疫共沉淀操作步骤是将抗体先结合到蛋白A/G琼脂糖珠上,然后再与抗原混合。相对其他方法,最终的得率较低,但避免了抗体共洗脱的问题。如果希望获得高纯度的目的蛋白,而不考虑非特异性结合,可以将抗体和蛋白样品在加入蛋白A/G琼脂糖珠之前进行混合,这样最后抗体也会和目的蛋白一同被洗脱下来,从...