变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。DGGE将凝胶设置在双重变性条件下,可以检测DNA分子中的任何一种单碱基的替代、移码突变以及少于10个碱基的缺失突变。由于具有精密控温系统,比一般聚丙烯酰胺凝胶电泳具有更高的可重复性,被广泛应用于基因突变检测及相关研究。简介 英文缩写DGGE...
变性梯度递增的方向与电泳方向垂直。所使用的胶为6%聚丙烯酰胺凝胶,变性浓度为0~100%。其中,含7 M尿素和40%去离子甲酰胺的胶为100%变性,不含尿素和去离子甲酰胺的胶为0%变性。垂直变性梯度凝胶电泳主要是检测引物的最适解链条件(即变性浓度)。 PCR产物加上样缓冲液后上样,300~400μl/孔,电压150V,温度60...
密度梯度电泳优点是可供更清晰的谱带适于纯度分析。简介 如果合成的聚丙烯酰胺凝胶从上至下是一个正的线性梯度凝胶,点在凝胶顶部的样品在电场中向着凝胶浓度逐渐增高的方向即孔径逐渐减小的方向迁移。随着电泳的继续进行,蛋白质受到孔径的阻力越来越大。电泳开始时,样品在凝胶中的迁移速率主要受两个因素的影响:一是...
温度梯度凝胶电泳是电泳技术的一种,通过物质在不同温度下性质的区别进行分离。温度梯度凝胶电泳(temperature gradient gel electrophoresis, TGGE)是电泳技术的一种,通过物质在不同温度下性质的区别进行分离。TGGE是一种有效的分离DNA、RNA或者蛋白的手段。它利用了不同分子在温度改变下构象的差别进行分离。另外一种类似...
温度梯度凝胶电泳是一种常用的核酸电泳方法,该方法可以分离不同大小的DNA或RNA分子,并定量测定目标分子的浓度。使用该方法前,需要进行样品制备,然后设置电泳条件,接着进行电泳和分析。下面将详细介绍温度梯度凝胶电泳的步骤。 二、样品制备 首先需要将目标DNA或RNA分解成单个链,加入测量所需的样品缓冲液中,并混匀。
分梯度凝胶电泳是使所制备的电泳凝胶形成从大到小的孔隙梯度,以期样品中各组分在电泳过程中穿过孔径逐渐减小的凝胶,以期得到更好的分离。利用电泳可以确定胶体微粒的电性质,向阳极移动的胶粒带负电荷,向阴极移动的胶粒带正电荷。一般来讲,金属氢氧化物、金属氧化物等胶体微粒吸附阳离子,带正电荷;非金属氧化物、...
变性梯度凝胶电泳(denatured gradient gel electrophoresis,DGGE)最初是Lerman 等人于20 世纪80 年代初期发明的,起初主要用来检测DNA 片段中的点突变。Muyzer 等人在1993 年首次将其应用于微生物群落结构研究 。后来又发展出其衍生技术,温度梯度凝胶电泳(temperature gradient gel electrophoresis,TGGE)。此后十年间...
梯度浓缩胶电泳液是一种常用的电泳液,其原理是利用梯度浓度的胶液,将目标分子分离出来。在电泳过程中,分子根据大小和电荷的不同,被吸引或排斥到胶液不同位置,从而实现了目标分子的分离。梯度浓缩胶电泳液中浓度逐渐变化,使得分子在逐渐变化的电场中运动,从而使得不同大小的分子在...
WB电泳梯度胶是一种由大孔径到小孔径逐渐变化的凝胶,它的孔径范围比单一凝胶大。在电泳过程中,分子量较大的蛋白质可以在凝胶顶部大孔径部分得到分离,而分子量较小的蛋白质可以在凝胶底部小孔径部分得到分离。此外,梯度凝胶还可以分辨分子量相差较小,在单一浓度凝胶中不能分辨的蛋...