变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。DGGE将凝胶设置在双重变性条件下,可以检测DNA分子中的任何一种单碱基的替代、移码突变以及少于10个碱基的缺失突变。由于具有精密控温系统,比一般聚丙烯酰胺凝胶电泳具有更高的可重复性,被广泛应用于基因突变检测及相关研究。简介 英文缩写DGGE...
变性梯度凝胶电泳(DGGE)是根据DNA在不同浓度的变性剂中解链程度的不同,导致电泳迁移率发生变化,从而将片段大小相同而碱基组成不同的DNA片段分开。当DNA片段泳动到某
变性梯度凝胶电泳(denaturedgradientgelelectrophoresis,DGGE)最初是Lerman等人于20世纪80年代早期发明旳,起初主要用来检测DNA片段中旳点突变。Muyzer等人在1993年首次将其应用于微生物群落构造研究。后来又发展出其衍生技术,温度梯度凝胶电泳(temperaturegradientgelelectrophoresis,TGGE)。今后十年间,该技术被广泛用于微...
DGGE(变性梯度凝胶电泳)是根据DNA在不同浓度的变性剂中解链行为的不同而导致电泳迁移率发生变化,从而将片段大小相同而碱基组成不同的DNA片段分开。当DNA片段泳动到某
变性梯度凝胶电泳(DGGE)变性梯度凝胶电泳(DGGE)hnxide 一、原理及定义 变性梯度凝胶电泳(denaturedgradientgelelectrophoresis,DGGE)最初是Lerman等人于20世纪80年代初期发明的,起初主要用来检测DNA片段中的点突变,DGGE是最灵敏的突变检测方法,其效率可达99%(Grompe1993)。Muyzer等人在1993年首次将其应用于微生物...
变性梯度凝胶电泳法依据首要的一点是:DNA双链末端一旦解链,其在凝胶中的电泳速度将会极剧下降。第二个根据是,如果某一区域首先解链,而与其仅有一个碱基之差的另一条链就会有不同的解链温度,其电泳速度也会有明显差别。因此,将样品加入含有变性剂梯度的凝胶进行电泳就可将二者分开(图 2, 1 和 2 道)。
变性梯度凝胶电泳的实验操作非常简单,准备一个用于变性梯度凝胶电泳的实验室,需要一台变性梯度凝胶电泳仪,并准备一种特殊的凝胶,可以在改变离子强度的基础上建立梯度。然后将样品和标准样品混合后,放入变性梯度凝胶电泳仪中,开始电泳,随着离子强度的不断改变,蛋白质分子会呈现出不同的分布状态,最后在合适的时间内收集电...
变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。DGGE(denaturing gradient gel electrophoresis)不是将分子量不同的DNA分开,而是通过聚丙烯酰胺凝胶中变性剂浓度梯度的不同,将序列不同的DNA分开。该方法的原理是根据DNA的解链特性,不同碱基组成的DNA双螺旋发生变性所要求的变性剂浓度不同,混...
变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据 DNA 片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链,称之为变性。核酸 50%发生变性时的温度称为熔 解温度(Tm)。Tm 值主要取决于 DNA 分子中 GC 含量的多少。DGGE 将凝胶设置在双重