一种MDCK细胞系的悬浮培养驯化方法,先用含血清培养基贴壁培养MDCK细胞,再经消化后,将所得细胞悬液置入摇瓶悬浮培养,传代3～4次后,将培养液离心,并使用化学限定培养基重悬细胞团,继续悬浮培养,传代至MDCK细胞完全单个悬浮生长。本发明的驯化方法,相较于逐步降血清法
一种MDCK细胞系的悬浮培养驯化方法,先用含血清培养基贴壁培养MDCK细胞,再经消化后,将所得细胞悬液置入摇瓶悬浮培养,传代3～4次后,将培养液离心,并使用化学限定培养基重悬细胞团,继续悬浮培养,传代至MDCK细胞完全单个悬浮生长.本发明的驯化方法,相较于逐步降血清法更快速高效,驯化时间仅需10代左右,远高于逐步降...
e.悬浮细胞的培养:选取组培常规方法继代2次以上的0.48g或0.52g质地坚硬、结构致密、颗粒松散、颜色鲜黄的愈伤加入到含有30mln6液体培养基的100ml三角瓶中,置于往复式摇床上28℃、110r/min黑暗条件培养,每5天继代1次,每次继续代时倾去占总体积2/3的上清液,补充新鲜的n6液体培养基至30ml继续培养,上述条件继代2次...
2. 方法。 (1)低血清培养驯化:取正常生长的贴壁MDBK 细胞,在培养基中添加部分低血清培养基,当细胞适应生长后逐渐加大低血清培养基添加量,直至全部更换为低血清培养。待细胞完全适应低血清培养后冷冻保存,备用; (2) 低血清悬浮培养驯化: 取已适应低血清培养的贴壁MDBK 细胞, 用胰酶消化后, 按照5×105 cells/ml...
7.权利要求1所述细胞系的制备方法,其特征在于,所述细胞系不需要血清来用于细胞 生长,并且无需附着用载体,可以悬浮培养,该方法包括: (a)准备从WHO获得的Vero细胞; (b)使所述Vero细胞适应在无血清培养基中生长;以及 (c)使步骤(b)中选出的贴壁Vero细胞在没有附着用载体的悬浮状态下生长。 8.一种生产疫苗用...
1.一种白背三七细胞悬浮培养体系的构建方法,其特征在于包括以下工艺步骤: (1)外植体消毒:选取白背三七嫩叶用清水洗净,在工作台中用2%~5%的洗洁精溶液漂洗1~5min,无菌水冲洗3~5次后用75%~80%乙醇溶液浸泡10~30s,0.1%~0.2%升汞溶液消毒5~10min,2%~4%次氯酸钠溶液消毒10~20min,无菌水冲洗4~6次,然后接种到...
所述方法包括：生成在贴壁细胞培养中生长的多个细胞克隆；鉴定具有高转染效率的一组细胞克隆；生成在悬浮细胞培养中生长的多个细胞克隆；以及鉴定适合于在悬浮细胞培养中产生病毒的细胞克隆。本文所公开的方法中的所述方法可以将驯化时间从至少 1 个月缩短到 7‑14 天，并且还可以大大减少驯化过程期间使用的培养基的...
本发明涉及一种用于培育肉苁蓉愈伤组织的细胞悬浮培养系的构建方法为:将固体培养基上生长的由肉苁蓉种子诱导得到的愈伤组织转移到添加2,4-D0.5-10mg/L的B5固体培养基进行继代培养形成的浅黄色,半透明,松软易碎的愈伤组织,再转接到相同组分和含量的液体培养基中,控制适当的培养条件并进行多次继代培养,便得到本发明稳...
本发明的制备紫背天葵胚性细胞悬浮培养细胞系的方法,是将紫背天葵胚性愈伤组织置于本发明的液体培养基中培养得到的悬浮培养细胞系。本发明中愈伤组织的诱导率可达到100%。本发明可有效地制备紫背天葵胚性细胞悬浮培养细胞系,为建立以紫背天葵为原料生物反应器提供了可靠基础。
本发明公开了一种适应在无血清全悬浮培养的MDCK细胞系生长的禽流感病毒的制备方法及通过该方法获得的禽流感病毒,包括以下步骤:1)制备待接种的MDCK细胞;2)准备毒种:准备鸡胚源禽流感病毒;3)F1代病毒驯化:4)F2代病毒驯化:取F1代中禽流感病毒血凝效价最高的时... 陈瑞爱,赖汉漳,刘玉鹏,... 被引量: 0发表:...