一种MDCK细胞系的悬浮培养驯化方法,先用含血清培养基贴壁培养MDCK细胞,再经消化后,将所得细胞悬液置入摇瓶悬浮培养,传代3～4次后,将培养液离心,并使用化学限定培养基重悬细胞团,继续悬浮培养,传代至MDCK细胞完全单个悬浮生长。本发明的驯化方法,相较于逐步降血清法
一种MDCK细胞系的悬浮培养驯化方法,先用含血清培养基贴壁培养MDCK细胞,再经消化后,将所得细胞悬液置入摇瓶悬浮培养,传代3～4次后,将培养液离心,并使用化学限定培养基重悬细胞团,继续悬浮培养,传代至MDCK细胞完全单个悬浮生长.本发明的驯化方法,相较于逐步降血清法更快速高效,驯化时间仅需10代左右,远高于逐步降...
s3.菜心悬浮细胞系的建立:将步骤s2获得的胚性愈伤组织接入液体继代培养基c中进行继代培养,最终获得均匀的悬浮细胞液,所述液体继代培养基c的配方为:ms+1.5mg/l毒莠定+1mg/l6-ba+30g/l蔗糖+400mg/l水解酪蛋白,培养基ph为5.8。 本发明提供一种建立菜心悬浮细胞系的培养方法,通过该方法能在短时间内获得大量均...
2. 方法。 (1)低血清培养驯化:取正常生长的贴壁MDBK 细胞,在培养基中添加部分低血清培养基,当细胞适应生长后逐渐加大低血清培养基添加量,直至全部更换为低血清培养。待细胞完全适应低血清培养后冷冻保存,备用; (2) 低血清悬浮培养驯化: 取已适应低血清培养的贴壁MDBK 细胞, 用胰酶消化后, 按照5×105 cells/ml...
摘要 本发明公开了一种建立菜心悬浮细胞系的培养方法,包括菜心无菌苗的培养、胚性愈伤组织的诱导和菜心悬浮细胞系的建立。本发明建立的菜心悬浮细胞系的培养方法,具有繁殖速度快,能在短期内提供大量均匀一致菜心悬浮细胞液的特点,为进一步利用基因工程等生物技术方法选育抗虫、抗逆、抗除草剂和其它优良性状的菜心新品种提...
7.权利要求1所述细胞系的制备方法,其特征在于,所述细胞系不需要血清来用于细胞 生长,并且无需附着用载体,可以悬浮培养,该方法包括: (a)准备从WHO获得的Vero细胞; (b)使所述Vero细胞适应在无血清培养基中生长;以及 (c)使步骤(b)中选出的贴壁Vero细胞在没有附着用载体的悬浮状态下生长。 8.一种生产疫苗用...
1.一种白背三七细胞悬浮培养体系的构建方法,其特征在于包括以下工艺步骤: (1)外植体消毒:选取白背三七嫩叶用清水洗净,在工作台中用2%~5%的洗洁精溶液漂洗1~5min,无菌水冲洗3~5次后用75%~80%乙醇溶液浸泡10~30s,0.1%~0.2%升汞溶液消毒5~10min,2%~4%次氯酸钠溶液消毒10~20min,无菌水冲洗4~6次,然后接种到...
1.一种罗汉果愈伤组织细胞悬浮体系的培养方法,其步骤如下: 1)接种和诱导罗汉果茎段愈伤组织,在添加0.2mg/l 6-BA+0.04mg/l NAA激素、2.5%蔗糖、4.0mg/l琼脂的MS液体培养基上继代培养,该培养基的pH为5.8,选取连续继代3-5次的新鲜、松软易碎的黄白色愈伤组织; 2)将步骤1)中得到的愈伤组织按接种量300g/l转...
所述方法包括：生成在贴壁细胞培养中生长的多个细胞克隆；鉴定具有高转染效率的一组细胞克隆；生成在悬浮细胞培养中生长的多个细胞克隆；以及鉴定适合于在悬浮细胞培养中产生病毒的细胞克隆。本文所公开的方法中的所述方法可以将驯化时间从至少 1 个月缩短到 7‑14 天，并且还可以大大减少驯化过程期间使用的培养基的...
1.一种葱莲胚性细胞悬浮培养系的建立和植株再生的方法,其特征在于,包括如下步骤: (a)诱导形成胚性愈伤组织; (b)建立胚性细胞悬浮培养系,获得直径大于0.7毫米的胚性细胞团; (c)利用步骤(b)获得的胚性细胞团再生植株,其中所述建立胚性细胞悬浮培养系包括如下步骤: (b1)破碎所述胚性愈伤组织获得直径不超过0.7...