⑴原代培养:取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞在传代之前称原代培养。 ⑵原代培养方法分类:贴块法和消化法。消化法又分为冷消化与热消化;一次性消化与分次消化。 主要步骤: 贴块法:将取得洗净并剔去多余成分的组织切成约1mm 3 大小的植块,用于植块培养。 消化法:将取得洗净并剔去多余成分的组织剪碎——...
复苏时，从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中快速融解，然后将细胞转入培养器皿中进行培养。在实际操作中，组织细胞原代培养的方法还包括组织块法和悬浮细胞培养法等。组织块法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶（或皿）中，瓶壁可预先涂以胶原薄层以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。悬浮...
原代细胞培养操作步骤：1、吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液。2、向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜。3、置37℃孵箱或室温（25℃温度）下进行消化，2~5min后把培养瓶放在 倒置显微镜 下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化。4、吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量...
1天前 原代细胞培养步骤: 1、准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。 3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的混合液中30-60分钟。...
原代细胞培养的步骤：取材→分离→培养和维持 1、取材 人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。(1) 取材的基本要求 ① 取材要注意新鲜和保鲜 ② 应严格无菌 ③ 防止机械损伤 ④ 去除无用组织和避免干燥 ⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等 ⑥ 作好记录 2、分离 人或动物体内...
利用原代细胞培养做各种实验，如药物测试、细胞分化及病毒学方面的试验效果很好。 操作步骤如下 1、剪切组织：先将所取得的组织，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手术镊去除黏附的结缔组织等非培养所需组织。再次清洗后，用手术刀将组织切成若干小块，移入青霉素小瓶或小烧杯中，加入适量缓冲液，用...
准备所需的消化酶（如胰蛋白酶、胶原酶等）、缓冲液（如PBS、Hanks液等）和培养基。二、细胞分离 1.组织处理：将组织块用剪刀剪碎成约0.5-1毫米的小块，以增加消化酶的接触面积。用缓冲液多次冲洗组织块，以去除血液残留和结缔组织。2.酶消化：将剪碎的组织块放入含有适量消化酶的锥形瓶中，置于37℃恒温摇床...
以下是细胞原代培养的实验步骤和注意事项: 1.组织分离:首先需要从生物体中收集组织样本,如肝、肺、心脏等。样本需要通过消化或机械分离等方法分离出单个细胞或小组织块。消化方法可以使用胰酶或胰蛋白酶等酶类来消化样本,机械分离则需要使用切割器或剪刀等工具。 2.细胞培养:分离出的组织块需要在含有营养物质和生长...
Part.01 原代小肠组织提取消化 1. 将小鼠安乐死。从回肠末端采集 15 厘米长的肠管。2. 去除外膜，用冷的 PBS 冲洗。用剪刀剪开肠段，使肠腔朝上。用冰冻 PBS 轻轻清洗剪开的肠段。3. 在 50 mL 离心管中加入 15 mL 冰冷 PBS。用剪刀将肠管剪成 1~2 mm 的小段，然后用 PBS 冲洗。重复清洗步骤，直至...
原代细胞培养的实验步骤一:组织收集和处理 从动物或人类组织中取得样本,并在无菌条件下处理。可以使用消化酶、机械切割或抗体磁珠等方法,将组织分解成单个细胞。 原代细胞培养的实验步骤二:细胞分离 通过筛选、沉淀或离心等方法,将可培养的目标细胞分离出来。例如,利用密度梯度离心法可分离出特定类型的细胞。