如果以溴酚蓝跑到胶的底部为准,26kD在10%的由下往上1/4的地方,而15%就在由下往上大约1/2(不太确定)的地方,对于分子量比较小的蛋白,当然是胶的浓度越大,分离效果越好.但是你必须考虑到,胶的孔径一旦小于蛋白-SDS复合体的直径,分子量大于这个蛋白的所有蛋白仍然不能有好的分离效果.如果孔径太大,所有蛋白都...
常用的分离胶浓度有6%、8%、10%、12%,分子量越大,所用的胶浓度越低,蛋白电泳速度越快。例如,测定100kDa分子量以上的蛋白可选择8%浓度的分离胶;测定20kDa分子量以下的蛋白可选择15%浓度的分离胶,中间的分子量可选用12%浓度的分离胶。 在Western Blot(WB)实验中,SDS-PAGE分离胶通常根据分子量范围的需求来选择...
不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样，比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白，...
二,考虑实验目的与样品性质 在选择分离胶与浓缩胶的浓度时,首先要考虑实验目的.例如,若需要分离混合物中的多个组分,可能需要选择较低的胶体浓度以获得更好的分辨率;而若仅关注某一特定组分的浓缩,则可能需要选择较高的胶体浓度. 此外,样品的性质也是影响胶体...
聚丙烯酰胺凝胶浓度与蛋白质分离范围的关系: 聚丙烯酰胺凝胶浓度/% 蛋白质分离范围/kd 5 36—200 7.5 24—200 10 14—200 12.5 14—100 15 14—60 浓缩胶浓度低;分离胶浓度高于浓缩胶,一般不小于5%。 8KD的蛋白质可能就要用Tricine–SDS-PAGE系统,因为浓缩胶和分离胶浓度太大,电泳速度很忙,很可能引起电泳带...
不知道分子量的情况下就尽可能选择浓度高的分离胶,因为浓度低的胶很有可能蛋白就跑出去了。先用高浓度的胶跑一次,然后看条带再调整下分离胶浓度再做一次就行了。另外,一般快速测定蛋白浓度的方法就是用分光光度计测量A280的吸光度,然后按照小牛血清蛋白(BSA)作标准曲线初步评估蛋白浓度。BSA在A280的吸光度为0.6的...
根据目的蛋白的分子量大小选择不同浓度的分离胶，8%、12%和15%三种浓度的分离胶就完全可以搞定日常蛋白的测定。一般测定100kDa分子量以上的蛋白可选择8%浓度的分离胶；测定20kDa分子量以下的蛋白可选择15%浓度的分离胶，中间的分子量可选用12%浓度的分离胶。有的时候蛋白跑不出来，其实未必是分离胶浓度...
1.配制分离胶浓度8%、体积15ml H2O 6.9ml 30%凝胶贮备液 4.0ml 1.5mol/L Tris-HCl(pH8.8) ...
浓缩胶一般都是5%的,下面的是5ML的配方,其余的你可以自己算了5mlH2O 3.6 acrylamide mix(30%) 0.621M Tris(PH6.8) 0.6310% SDS 0.0510% AP 0.05TEMED 0.005相关推荐 1电泳浓缩胶浓度怎么选取?我的蛋白大约21kd,找了很多配方,现决定用15%的分离胶,但是浓缩胶的浓度该怎么选取呢?是不是有选择标准还是?那5%的...