CO-IP其实就是验证AB两个蛋白是否结合相互作用,做法就是制备AB两个目标蛋白都有的蛋白样品,然后用A蛋白或者B蛋白的抗体挂在磁珠上去拉这个蛋白样品,用拉下来的溶液(蛋白)去做wb,wb用的A蛋白抗体或者用B蛋白抗体都能杂到,就证明AB用结合,因为A抗体只能拉A蛋白,如果用B抗体杂到了,证明B和A结合在一起被拉下来...
免疫共沉淀Co-IP实验操作步骤 一、原理: 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如...
3. 双层过滤上清,测量蛋白浓度。五、Co-IP实验1. 向蛋白粗提液中加入抗体耦联的琼脂糖珠,4°C下孵育、洗涤。2. Western blot分别检测融合标签,验证Co-IP。 有需要的小伙伴们可以随时来咨询!符合SCI标准!可免费提供实验设计,实验结果有保证哦~坐标南京,全国都可接哦!!#coip #免疫共沉淀 #实验代做 #实验设计...
免疫共沉淀Co-IP实验步骤 Co-IP实验步骤 一、制备细胞样品 1.10cm盘细胞用PBS清洗两次,加入1mL RIPA裂解液和10μL PMSF (100mM稀释至1mM); 2.充分混匀吹打后,冰上裂解4h,充分吹打吸入1.5mL EP管中, -80℃保存; 3.取出样品,1200rpm离心10min,取上清弃沉淀,测定蛋白浓度。 二、Co-IP,拉出蛋白 1.每管...
Co-IP实验步骤 一、制备细胞样品 1.10cm盘细胞用PBS清洗两次,加入1mL RIPA裂解液和10μLPMSF(100mM稀释至1mM); 2.充分混匀吹打后,冰上裂解4h,充分吹打吸入1.5mL EP管中, -80℃保存; 3.取出样品,1200rpm离心10min,取上清弃沉淀,测定蛋白浓度。 二、Co-IP,拉出蛋白 1.每管取出少量蛋白样(15~30μL)...
建议先做过表达CO-IP作为对照。Detaibio提供免疫共沉淀CO-IP检测服务，可对两种已知蛋白是否存在相互作用进行验证，也可以验证在总蛋白中是否含有与已知蛋白相互作用的未知蛋白。通过SDS-PAGE银染，结合Western Blot及液相质谱等对两种蛋白之间是否存在相互作用进行定性分析。
免疫共沉淀（Co-IP）实验步骤 免疫共沉淀实验主要包括了4个步骤：1.制备蛋白质混合物（细胞裂解液或组织提取物）；2.用结合有特异性抗体的亲和珠孵育蛋白质混合物；3.通过多个洗涤步骤清除未结合的蛋白质；4.通过SDS-PAGE，蛋白质印迹或质谱（MS）分析检测相互作用蛋白。相关服务 CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析 ...
WB实操详解,蛋白免疫印迹 08:44 02【Western Blot常见问题分析】无信号/多条带/高背景/小tips/失败原因,蛋白免疫印迹WB 02:29 03【CO-IP免疫共沉淀】实操详解+注意事项,操作要点,分子互作实验 04:20 【小鼠尾静脉注射】全网最全详解!动物实验操作+注射细节+失败演示 福州载基生物 1.9万 331 【Western Blot...
Co-IP(免疫共沉淀,co-inmunoprecipitation)是经典的利用抗体从样品中捕获靶蛋白及其互作蛋白、复合体的一项技术,能够特异性富集所研究的目的蛋白。 免疫共沉淀Co-IP实验步骤 细胞转染 1.铺细胞,转染细胞。本次转染的两个蛋白分别带有FLAG和HA标签。 裂解细胞 2.去除培养基,PBS吹下细胞,离心去上清。将细胞沉淀转移...