为进一步证实PCR产物为ILJ6扩增产物.将所 得PCR产物与T-载体进行连接.转化DH5c~.用通 用引物对重组质粒DNA 测序.结果如下.经BLAST 软件进行同源性分析表明,泫序列为ILfocDNA 序 列,但有一个碱基突变(下划线为突变碱基),由T 突 变为c,但氨基酸密码子并不发生改变,属无义突变. CCTTCCCTCCACTTeCC11...
上游引物的核苷酸序列分别为:APRE:5′CTT CTG GGA ATT CCT A 3′;NF-IL-6/ATF:5′GAG ATG ACG TAG TTT TCG CGC TT 3′。下游引物与上游引物互补。探针以常规方法掺入α-32P-dATP标记,终浓度3μmol/L。 2.结合反应:根据蛋白浓度,在同一实验中取等量的核蛋白样品。结合反应体系中包括:核蛋白5μl;5×...
目前的研究发现NF-κB、Fos/Jun及糖皮质激素受体等转录因子与IL-6基因启动子区相应序列结合后, 可在转录水平高度调控IL-6基因的表达[14-17]. 因此IL-6基因启动子区的多态性可能会导致其个体间基因转录与表达的差异, 进而影响到个体对病毒感染疾病的易感性. 在我们的研究中发现, IL-6启动子区三个多态性位点-...
(3)活体荧光成像 (4)流式细胞术 (5)重叠延伸PCR:是在PCR的基础上,采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成了重叠链,从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸,将不同来源的扩增片段重叠拼接起来的新技术。 (6)ELISA (7)共聚焦显微成像。 03 文章主要内容摘要 ABSTRACT IL-6参与炎症扩增、肿瘤进展和许多其他疾病...
然后使用特异于人κ轻链可变区序列框架1的5’简并引物集合和特异于小鼠κ轻链恒定区的3’巢式引物,再次通过PCR扩增该扩增子。将重链和轻链PCR产物克隆进分别包含IgG1重链恒定区和κ轻链恒定区的Sap I线性化抗体载体中。重链质粒在重链表达盒两侧具有lox2272位点和lox511位点。此外,在重链质粒中紧接着lox2272的...
(1)若利用化学方法合成rhIL-6基因,通常需先根据IL-6的___设计出rhIL-6的基因序列,在设计时,还要尽可能依据___细胞偏好的密码子。在利用PCR扩增rhIL-6基因时,为提高引物与模板结合的效率,设计引物需避免两个引物或1个引物不同区段的碱基序列___。在构建重组质粒时,要选择在宿主菌中___水平高的质粒作为载体...
小弟先需要做RT-PCR，求助人IL-10、IL-12引物序列…跪谢 发自小木虫IOS客户端
目的:建立eNOS基因VNTR多态性的PCR分析方法.方法:按eNOS基因VNTR位点侧翼序列设计引物,自健康献血者基因组DNA扩增VNTR片段,琼脂糖凝胶电泳分析扩增片段的长度和数目,鉴定VNTR基因型.结果与结论:在208名健康献血者中鉴定出6/5杂合、5/5纯合、5/4杂合和4/4纯合4种VNTR基因型;等位基因的分布频率与日本人相似,但与美国...
摘要 目的 了解我国广东地区汉族人群白细胞介素-6(IL-6)基因启动子-572C/G和-174G/C位点单核苷酸多态性对类风湿性关节炎(RA)的影响.方法 应用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)检测168名体检健康者和120例RA患者的IL-6基因启动子-572和-174位点的基因型.结果 我国广东地区汉族人群IL-6基因启动子-572...
为建立一种快速检测牛病毒性腹泻病毒病原的方法,本研究根据GenBank上登录的牛病毒性腹泻病毒(bovine vi-ral diarrhea virus,BVDV)基因组序列,设计1对引物,建立了检测B... 王春庆 - 《中国畜牧兽医》 被引量: 9发表: 2013年 实时荧光定量RT-PCR检测1型鸭病毒性肝炎方法的建立和应用 本文围绕检测1型鸭病毒性肝炎...