总结: FISH与核质分离实验有相同的功能,都可以观察lncRNA的亚细胞定位,即lncRNA定位于胞浆还是胞核;FISH的图片应标注清楚每个图片中荧光所表示的分子,分组情况也要表明图注中应该包含细胞系的名称和处理方法,每种颜色的所代表的分子,这里标注的方式比较特别,直接在图上用不同的颜色来输入分子名称,用以代表荧光颜色,...
了解蛋白的亚细胞定位对于研究基因的功能、蛋白互作及其作用机理具有重要意义。本实验旨在利用荧光蛋白原位鉴定法,观察目标蛋白在细胞内的具体位置,从而了解其亚细胞定位。 二、实验材料与仪器 1. 实验材料: (1)烟草种子; (2)农杆菌(GV3101、EHA105、LB4404等); (3)构建好的载体质粒; (4)亚细胞定位培养基; (5...
一、实验准备阶段 细胞选择与培养: ●选择适合实验的细胞系——如哺乳动物细胞、植物细胞等。 ●在适当的培养条件下进行细胞培养,确保细胞处于对数生长期,且状态良好。 载体构建: ●设计并构建亚细胞定位载体,通常是将目标基因与报告基因(如绿色荧光蛋白GFP)融合,并插入到表达载体中。 ●使用引物设计软件...
今天普拉特泽生物继续跟大家一起学习新的实验——亚细胞定位实验是一种用于确定生物大分子(如蛋白质、核酸等)在细胞内的具体存在位置的生物学实验方法。 ——以下是关于亚细胞定位实验的详细解析: 一、实验定义 亚细胞定位实验旨在揭示细胞内各种生物大分子的精确定位,这对于理解它们的生物学功能、相互作用以及细胞的整体...
🧪代做/设计 蛋白亚细胞定位检测‼️。1️⃣实验简介蛋白的亚细胞定位指蛋白在细胞内的特殊定位,决定了蛋白的功能。通过与marker蛋白共表达,再用激光共聚焦检测二者的共定位情况,就可以确认待测蛋白的定位。 2️⃣实验原理(见图2)将 - 飞翔的米粒于20
1、亚细胞定位Confocus一、实验材料玻片,镒子,75%酒精,细胞转染用物品,PBS, 4%多聚甲醛,Trixon-X-100, 铝箔,摇床,DAPI染色液,荧光封片液,指甲油,载玻片,激光扫描共 聚焦显微镜(型号:ZEISS LSM 510 META),光盘二、实验原理亚细胞定位是指某种蛋白或表达产物在细胞内的具体存在部位,如胞 核,胞浆内,细胞膜或...
实验方法 按实验材料的不同分为三类：一、原生质体 构建载体→制作原生质体→转化质粒→激光共聚焦显微镜观察 二、烟草叶片构建载体-农杆菌转化-注射烟草叶片-激光共聚焦显微镜观察三、动物细胞构建载体-转化质粒-激光共聚焦显微镜观察敲黑板 划重点：共定位实验，一定要选用文献已发表的做过亚细胞定位的蛋白作为对照哦！...
亚细胞定位是指生物大分子物质或脂类在细胞内的具体位置。蛋白质在细胞质中合成后,通过蛋白质分选信号被转运到特定的亚细胞结构中,参与细胞的各种生命活动。这个过程称为蛋白质亚细胞定位。 实验原理 利用GFP、RFP等荧光蛋白的独特荧光性质和灵敏性,可以示踪细胞内的蛋白。将目标蛋白与荧光蛋白的N端或C端融合,通过瞬转...
好了,关于转录因子亚细胞定位的实验就介绍这么多啦,大家只要记住转录因子的亚细胞定位一般是定位在细胞核中的,但是也有例外,上面的两个栗子就是很好的说明。 02转录激活验证 下面我们来聊一聊转录因子的转录激活分析,在讲这个之前,我们先来回顾一下酵母双杂的定义,这对于大家理解转录因子的转录激活分析会有帮助哦! 酵...
一、亚细胞定位实验仪器设备 二、亚细胞定位培养基配方 121℃高温蒸汽灭菌20分钟。 三、亚细胞定位实验步骤 1,烟草培养:播种烟草种子若干,12h光照培养,培养一个月即可用于实验; 2,农杆菌培养:将构建好的载体质粒电转化法转入农杆菌(GV3101,EHA105,LB4404等),30培养2天; ...