YTHDF2作为最早被鉴定的m6A修饰阅读蛋白之一,主要分布于细胞质中,介导m6A修饰的mRNA代谢,包括调控靶mRNA的翻译与稳定性等【4】。YTHDF2由一个负责结合m6A的C端YTH结构域和一个富含P/Q/N的N端结构域组成,其表达或功能异常与多种肿瘤的发生与转移密切相关,是潜在的肿瘤治疗靶点之一【5】。目前已报道的YTHDF2蛋白...
为了探讨YTHDF2在肿瘤发展中的作用,作者构建了Ythdf2f/f(对照)和Ythdf2cKO(YTHDF2缺失)小鼠模型,并将B16-OVA黑色素瘤细胞、MC38结直肠癌细胞分别皮下注射到Ythdf2f/f、Ythdf2cKO、小鼠中,发现与Ythdf2f/f小鼠相比,Ythdf2cKO小鼠的肿瘤体积和重量显著减少(图1a、b)。此外,在一个黑色素瘤肺转移模型中,...
YTHDF2的SUMO化修饰主要发生在第571位赖氨酸残基上。通过生化、细胞学实验、MeRIP-Seq和RNA-Seq和小分子抑制剂等多种新技术方法,证明了YTHDF2的SUMO化修饰显著增强其与m6A-mRNA结合能力,从而促进大部分mRNA发生降解。同时发现,这SUMO化修饰未影响到YTHDF2的泛素化修饰及其在细胞内的定位等。最后,他们阐明了YTHDF2...
作者首先通过TCGA等多个胶质瘤数据库进行生信分析,发现m6A修饰关键酶YTHDF2在GBM中高表达。在胶质瘤细胞系(Hs683、SW1783)、GBM细胞系(T98G、U87 MG、U251 MG、LN229)和胶质瘤干细胞(GSC11、GSC17、GSC20、GSC23、GSC7-2、GSC6-27)进行Western blot检测,以及对人胶质瘤组织标本进行免疫组化(IHC)染色,结果...
原目标二：明确YTHDF2通过调控m6A—mRNA表观组干预缺氧相关HCC进展完成情况：我们发现YTHDF2在HCC肿瘤组织中的表达水平明显低于瘤旁，且其表达水平与HCC病人的预后呈显著正相关。原目标三：解析YTHDF2调控HCC细胞生物学行为的表观分子机制 完成情况：我们发现YTHDF2缺失后，HCC细胞的增殖及促血管生成能力显著增强：...
第一部分：缺氧调控m6A阅读子YTHDF2促进肝癌进展 1.1发现人HCC组织m6A-mRNA修饰丰度及表达水平上调 收集并提取37例HCC病人的肿瘤及瘤旁组织总RNA及mRNA，通过斑点杂交（Dot Blot）实验和LC-MS／MS发现肿瘤组织总RNA的m6A丰度稍低于瘤旁组织，而mRNA的m6A丰度则显著高于瘤旁组织（图1A）：通过MeRIP-Seq联合RNA-Seq...
本课题首先基于基因文库筛选出的YTHDF2(YTH domain family 2)基因构建稳定敲低YTHDF2表达的MM细胞系,进行细胞增殖及细胞周期等表型研究和动物实验的验证.其次,通过m6A(N6-methyladenosine)甲基化的高通量测序寻找YTHDF2可能调控的下游基因,探究其通过m6A甲基化修饰调控MM细胞增殖的潜在机制.本研究拟为MM的治疗提供新...
主要结论:该研究首次在胃癌中发现HIF-1α诱导的lncRNA CBSLR通过招募YTHDF2蛋白和CBS mRNA形成CBSLR/YTHDF2/CBS复合物,进而以依赖m6A方式降低CBS mRNA的稳定性。在缺氧的肿瘤微环境下,CBS表达下调抑制了ACSL4蛋白的甲基化,促进其通...
m6A修饰与肿瘤发生、增殖、分化、肿瘤侵袭及转移息息相关。近年来,关于肿瘤浸润的髓系细胞(TIMs)中的m6A修饰在塑造肿瘤免疫和免疫治疗中发挥作用的研究较多,但在肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)中的效应机制尚未阐明。YTHDF2是一种m6A阅读蛋白,可以介导m6A修饰的mRNA的代谢,包括调控靶mRNA的翻译与稳定性等。本文作者阐述了YT...
N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰是真核生物 mRNA 转录后 修饰中最常见、最丰富的化学修饰之一,由“Writer”甲基转移酶复合体(包括 METTL3、METTL14 及辅助因子 WTAP 等),“Reader” RNA 阅读蛋白(包括 YTH 域家族 YTHDF...