IPTG为安慰型诱导物,可诱导β-半乳糖苷酶的产生,X-gal是β-半乳糖苷酶的作用底物,在β-半乳糖苷酶的作用下X-gal被切割成半乳糖和深蓝色的物质:5-溴-4-靛蓝,有色物质可使所在的菌落呈现蓝色。 但当含有lac启动子的质粒中插入了外源基因,则不能产生β-半乳糖苷酶,因此不能分解X-gal产生蓝色底物,所在的菌...
X-Gal是β-半乳糖苷酶的底物，水解后呈蓝色。基于此功能，当以lacZ缺陷型细胞为宿主转化pUC系列载体DNA（或其他带有lacZ基因的载体DNA）时，或者当用X13 Gal和IPTG进行M13噬菌体载体DNA转染时，由于α β-半乳糖苷酶的互补性可以根据是否存在白色菌落（或噬菌斑）轻松选择基因重组体。
IPTG是为了诱导乳糖分解相关酶的编码基因表达，使得培养基中的乳糖得以被分解产生半乳糖。X-gal一种酵母半乳糖苷酶显色底物，可以与分解产生的半乳糖结合生成蓝色物质，用于蓝白斑筛选。
x-gal是显色剂，amp是抗生素，iptg是诱导剂。在蓝白斑筛选中，iptg可以诱导x-gal显色。amp用于抗性...
以防止暴露在光线下，损坏，应在-20°C下保存， X-gal溶液无需通过过滤灭菌。4.IPTG-X-gal平板制备：将40 µL X-gal储备溶液和5 µL IPTG储备溶液添加到氨苄或卡那抗生素平板上（如果体积太小，包衣将是均匀的，可以涂布后适当稀释），均匀涂布并干燥后再使用。使用前1小时准备。
IPTG可诱导载体Lac操纵子DNA 区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段，该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补)。实现α互补的细菌铺在含有X-gal生色底物的培养基上，可形成蓝色菌落。外源DNA插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用，将产生白色菌落。此产品为X-gal用DMF溶解过滤后配成的...
2.含X-Gal的培养基应在4℃的黑暗环境中保存，必须在1-2周内使用。3.为便于实验操作，还可以根据细菌溶液的体积和板数来计算X-gal和IPTG储备溶液的浓度，并直接添加到准备用于包被的细菌培养液中。盘子。涂层平坦，因此可以节省测试时间。如果培养后生长的菌落的蓝色和白色斑点不够明显，可以将板放入4度冰箱中，...
X–Gal是β–半乳糖苷酶(β–galactosidase)的底物,水解后呈蓝色。基于这个特点,pUC系列载体DNA(或其他带有lacZ 基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑...
x-gal 蓝白斑菌落形成原理 X-gal 蓝白斑菌落形成实验是分子生物学中筛选重组质粒的经典方法,其原理涉及载体的 lacZα 基因、宿主菌的 lacZΔM15 基因、X-gal 和 IPTG 等多个关键因素的相互作用,具体如下: 1. 载体与宿主菌的基因互补:在一些常用的载体(如 pUC 系列质粒)上携带 lacZα 基因,它编码β-半乳糖...