IPTG是为了诱导乳糖分解相关酶的编码基因表达，使得培养基中的乳糖得以被分解产生半乳糖。X-gal一种酵母半乳糖苷酶显色底物，可以与分解产生的半乳糖结合生成蓝色物质，用于蓝白斑筛选。
细菌蓝白斑筛选原理:IPTG为安慰型诱导物,可诱导β-半乳糖苷酶的产生,X-gal是β-半乳糖苷酶的作用底物,在β-半乳糖苷酶的作用下X-gal被切割成半乳糖和深蓝色的物质:5-溴-4-靛蓝,有色物质可使所在的菌落呈现蓝色。但当含有lac启动子的质粒中插入了外源基因,则不能产生β-半乳糖苷酶,因此不能分解X-gal产生...
主要作用:异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用 IPTG是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性,当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ基因载体DNA)以lacZ缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG...
主要作用:异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用 IPTG是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性,当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ基因载体DNA)以lacZ缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG...
在诱导剂IPTG的作用下具有活性的β-半乳糖苷酶可以使无色化合物X-gal降解生成深蓝色物质,从而使培养菌落变成蓝色。现在使用的许多质粒载体,如pGEM-TVector都带有一个E.coliDNA的短区段,其中含有β-半乳糖苷酶N端片段的编码信息及调控序列,在这个编码区中插入了一个多克隆位点,如果外源DNA...
【题目】2.干扰素具有抗病毒、抑制肿瘤及免疫调节等作用。质粒中的LacZ基因可表达出β一半乳糖苷酶,当培养基中含有 IPTG和 X一gal时,X-gal便会被β一半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌形成蓝色菌落,反之则形成白色菌落。如图是将人干扰素基因导入大肠杆菌,培养后生产干扰素的过程。EcoRIEcoRVEcoRVBamHI青霉素③抗性...
培养基中添加的氨苄青霉素,x-gal和iptg分别起什么作用960化工网专业团队、用户为您解答,有培养基中添加的氨苄青霉素,x-gal和iptg分别起什么作用的疑问
由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下，在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落，因而易于识别。然而，当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选，又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物...
许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因,其编码的产物β半乳糖苷酶在Xgal和IPTG存在时,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞,过程如下图所示。下列说法错误的是( )(2)DNA连接酶①种类:按来源可分为E·coli DNA连接酶和...