一、WB实验的基本原理：蛋白质免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志，检测蛋白质的方法很多，除 ELISA 法外，也可用与检测 DNA 和 RNA 相类似的吸印方法。与Southern或Northern杂交方法...
3.1 总蛋白提取 3.1.1.细胞样品加入400ml的裂解液（使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂）。设置匀浆程序进行匀浆；如果需要提高蛋白浓度，可以适量减少裂解液体积。3.1.2. 将匀浆完成的匀浆管取出，放置冰上裂解液30min，每隔 5min震荡一次确保组织完全裂解。3.1.3. 17000g，4℃，离心 10min，收集上清，即为...
蛋白质 D. 多糖 E. 脂质 相关知识点: 试题来源: 解析 C。解析:免疫印迹试验(Western blot)可用于检测蛋白质,它是将蛋白质经电泳分离后转移到膜上,再与特异性抗体反应,通过显色或化学发光等方法显示出目标蛋白质。不用于检测DNA、RNA、多糖或脂质。
①将蛋白电泳后的凝胶浸入电转缓冲液中15min。 ②将电转膜(醋酸纤维素膜)先在甲醇中浸泡至完全湿润(甲醇用于活化电转膜上的基团,可能是使得膜上的正电性增强),然后再将膜浸入超纯水中5min,最后再将膜浸入电转液中15min。 ③滤纸先在电转液中完全浸湿,然后将滤纸平...
以下是西方博检测蛋白质表达实验的结论和注意事项。 结论: 1.蛋白质的分子量:西方博通过与已知分子量的标准品比较,可以确定待测蛋白质的精确分子量。根据蛋白质在凝胶上的迁移距离,可以使用特定的分子量标准品绘制标准曲线,并在曲线上确定待测蛋白质的分子量。 2.蛋白质的表达水平:西方博使用特异性抗体来检测特定...
通过Western blot实验可以得出以下结论: 1.确定蛋白质的表达水平:Western blot可以定量检测特定蛋白质在样本中的表达水平,比如癌细胞中的肿瘤抑制因子的表达水平是否下调,通过和对照组的比较可以得出结论。 2.确定蛋白质的鉴定:Westernblot可以用于鉴定特定蛋白质的存在与否,通过与已知目标蛋白的分子量进行比较,可以确定其...
蛋白质印迹（Western Blotting，WB）即是依托于电泳技术分离出蛋白质并对其进行半定量甚至定量分析的一种...
Western Blot技术也被称为蛋白印迹技术,是一种通过电泳分离样品中的蛋白质,然后通过膜转移、靶向蛋白质的抗体检测等步骤来检测特定蛋白质的方法。其主要原理如下: (1)电泳分离样品中的蛋白质:Western Blot技术使用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)等方法对样品进行分离,使用电泳输送将被分离出的蛋白质定位到凝胶上的特定...
Western blot检测蛋白质的表达实验的结论通常包括以下几个方面: 1.蛋白质的表达水平:通过比较目标蛋白质与内参蛋白质的信号强度,可以得出目标蛋白质在样本中的表达水平。 2.蛋白质的分子量:通过比较标准蛋白的分子量和目标蛋白质的分子量,可以确定目标蛋白质的分子量。 3.蛋白质的特异性:通过比较阳性对照和阴性对照...