PCR、Western Blot和ELISA是三种常用的分子生物学技术,它们各自具有独特的优点和局限性。 PCR(聚合酶链反应) · 适用场景:PCR是一种分子生物学技术,用于扩增特定的DNA片段。它适用于检测基因的存在、表达水平(绝对定量和相对定量)以及基因突变的分析。 · 优势:PCR能够快速扩增极少量的DNA模板,灵敏度高,操作相对简便...
PCR、Western Blot和ELISA是三种常用的分子生物学技术,它们各自具有独特的优点和局限性。 PCR(聚合酶链反应) · 适用场景:PCR是一种分子生物学技术,用于扩增特定的DNA片段。它适用于检测基因的存在、表达水平(绝对定量和相对定量)以及基因突变的分析。 · 优势:PCR能够快速扩增极少量的DNA模板,灵敏度高,操作相对简便...
客观上应该一致,但由于蛋白、RNA单方面验证或者两方面验证失误,导致两个层面表达结果不一致 Part1:Western Blot 蛋白层面 一、蛋白样品制备环节失误 取材到液氮速冻耗时过长,蛋白发生降解 取材后,制样时,没有保持低温环境 没加蛋白酶抑制剂,蛋白发生降解 二、蛋白发生可逆性沉淀 低温保存时,蛋白浓度高容易导致蛋白沉...
基因翻译蛋白质，PCR可以检测基因的表达量，绝对定量和相对定量。但基因翻译表达蛋白质是个复杂的过程，有可能出现基因量大而蛋白质少，或者相反，甚至其他情况。所以，PCR是从基因层面DNA或mRNA进行的检测，而Western Blot是目前一种结合内参对蛋白质进行半定量的方法，Elisa可以定量检测某些蛋白、激素等。一、目的 虽然...
Western-blot实验原理: 蛋白质印迹法又称为免疫印迹法,这是一种可以检测固定在固相载体上蛋白质的免疫化学技术方法。经过SDS-PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原与对应的...
Western-blot实验原理: 蛋白质印迹法又称为免疫印迹法,这是一种可以检测固定在固相载体上蛋白质的免疫化学技术方法。经过SDS-PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原与对应的...
一、免疫组化原理 二、免疫组化实验步骤 三、免疫组化应用实例 推荐内容 免疫学必备三件套：蛋白质免疫...
这样就导致了一种现象,默认蛋白Western blot(WB)检测结果本该像中心法则那样,与基因组水平的DNA测序结果相对应,然而却发现蛋白的WB结果与DNA的PCR和测序结果不一致,我们开始慌了,这究竟怎么回事,这个模型没有构建成功?如果遇到这种问题,我们该如何处理呢?
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Western blot&PCR 常用内参分类 Westernblot&PCR常用内参分类常用内参：β-acting、β-tublin核蛋白内参：LaminA、LaminB膜蛋白：α-acting、GAPDH qPCR内参β-acting、GAPDH、18SrRNA、β-tublin、Ubiquitin、U6