RTPCR和western Blot等体积混合milliporeimmobilonwestern化学发光hrp底物a液和b液将pvdf膜浸在液体孵育5min然后用保鲜膜包好用吸水纸吸去残余液体膜正面朝上固定在压片夹中暗室中将感光胶片放入压片夹中适当时间后取出胶片放入显影机中显影 一、RT-PCR步骤RNA提取(-70℃保存) 1.组织剪碎加入1ml Trizol,冰上匀浆(边...
RT-PCR及western blot服务 RTPCR检测服务中采用SYBR Green染料法/探针法进行RT-PCR相对定量检测服务,即用已知管家基因做为内参照,根据目的基因和管家基因的相对表达作为定量的最后结果。 产品描述 RT-PCR服务简介 RT-PCR检测服务中采用SYBR Green染料法/探针法进行RT-PCR相对定量检测服务,即用已知管家基因做为内参照...
基因翻译蛋白质，PCR可以检测基因的表达量，绝对定量和相对定量。但基因翻译表达蛋白质是个复杂的过程，有可能出现基因量大而蛋白质少，或者相反，甚至其他情况。所以，PCR是从基因层面DNA或mRNA进行的检测，而Western Blot是目前一种结合内参对蛋白质进行半定量的方法，Elisa可以定量检测某些蛋白、激素等。一、目的 虽然...
RT-PCRWestern blotELISA三者区别 PCR转录水平检测目基,非蛋白,转录翻译复杂程,基表达量与蛋白表达量定相关. WB能半定量,检测细胞膜蛋白,点ELISA做 ELISA用定量检测蛋白,说观察同浓度刺激物目蛋白影响 基翻译蛋白质, PCR检测基表达量绝定量相定量基翻译表达蛋白质复杂程能现基量蛋白质少或者相反甚至其...
Western blot 检测的是蛋白水平，而RT-PCR检测的是mRNA，即基因水平的变化，一般来说，二者是平行关系，即基因水平的变化会引起蛋白水平相应的变化，但是从基因到蛋白也存在修饰等因素存在而出现基因水平升高而蛋白水平没有变化的情况，所以二者反应的是不同层次的变化。回复:这只是从不同的角度来分析，...
1、Western blot实验技巧之蛋白样品制备、SDS-PAGE胶制备、跑电泳、转膜、孵育抗体、显影和ImageJ分析（...
免疫学实验技术及荧光定量PCR 内容提要 ➢抗原和抗体➢ELISA➢Westernblot➢免疫组化（免疫荧光）➢RealTimePCR 抗原和抗体 抗原的基本知识抗体的基本知识多克隆抗体单克隆抗体 抗原和抗体 抗原的基本知识 定义：抗原（antigen）是能够刺激机体产生免疫应答的效应物质（抗体和致敏淋巴细胞），并...
导读: WB是蛋白研究中最常用的方法之一,但因为其步骤繁杂结果变幻莫测成为很多新手的梦魇。希望小伙伴们看完此文章,好好学习实验protocol资料,在蛋白研究中取得更加高效的成果。 1 简述Western Blot(简称WB)…
如果是单次的结果，Western blot和RT-PCR呈相反趋势并不能说明什么问题 比如mRNA与蛋白量的变化不一定呈线性一致性的关系，它与转录效率，转录后降解的速度也很有关系。翻译水平上各种因素调节的关系，其中存在某种调控机制在发育的初始阶段，从翻译水平上抑制了这个蛋白的表达。发育中后期由于另外一些因子...
RT-PCR,Western blot和ELISA三者的区别 RT-PCR我想你应该说的是Real time PCR或者Q-PCR吧,它主要是在转录水平研究目的基因表达的情况,一定程度上可以反映蛋白最终的表达量。WB和ELISA还有IHC(免疫组化)是目前国际上研究蛋白的主要手段和方法,他们三个分别用于蛋白的定