洗涤后,使用稀释二抗,并按数据表上推荐的浓度在室温下孵育膜1小时,然后使用用大量的TBS间液冲洗膜,剧烈搅拌5次,每次5分钟。 1.4 检测(Detection) 在最后阶段,利用HRP(horseradish peroxidase)酶偶联到二级物上,催化ECL(enhanced chemiluminescence)反应产生光。然后,光被收集到x射线胶片上,在足够灵敏的专用相机的帮助...
化学发光检测 Chemiluminescence Detection 化学发光是一种化学反应,酶(通常是辣根过氧化物酶(HRP))催化化学底物(例如鲁米诺)的氧化反应,该氧化反应产生光作为副产物,光可由胶片或由数字成像仪捕获。 鲁米诺发光比较微弱,因此需要在反应体系中添加增强剂以增强信号,这种增强通常称为增强化学发光(ECL)。有许多种类的增强...
Chemiluminescence is the most common method for detecting proteins on western or dot blot membranes. The enhanced chemiluminescent Novex ECL substrate enables immunodetection of horseradish peroxidase (HRP)–conjugated secondary antibodies using film and X-ray developer or an imaging system....
pIMAGO是一种用于西方印迹(Western blot)的检测试剂,能够与蛋白质上的磷酸化氨基酸残基发生特异性反应,从而允许研究人员检测和定量蛋白质样品中的磷酸化水平。 值得注意的是: 艾美捷pIMAGO HRP磷酸化蛋白Western Blot检测(完整试剂盒)(TMR-800-40)在这篇文章中的主要作用包括: 检测RcCDPK1的自磷酸化:文章中提到,通...
Bio-Rad TidyBlot Western Blot Detection Reagent:HRP 产品类型:辅助试剂 规格:50 µl STAR209PT 我要询价 添加 Bio-Rad TidyBlot Western Blot Detection Reagent:HRP 产品类型:辅助试剂 规格:0.5 ml STAR209P 我要询价 添加 Bio-Rad Streptavidin 产品类型:辅助试剂 规格:5 mg 8429-9004 我要询价 添加...
HRP(辣根过氧化物酶)是Western blot中常用的酶促底物之一。不同酶促底物的原理如下: HRP酶促底物原理: 1.过氧化物酶(HRP)反应:HRP底物通常是一种无色化合物,例如TMB(三甲基苯胺基甲酸甲酯)或DAB(二氨基联苯胺)。 2.底物氧化反应:在HRP存在下,TMB或DAB与过氧化氢(H2O2)反应产生氧自由基。 3.显色反应:氧...
艾美捷pIMAGO HRP磷酸化蛋白Western Blot检测(完整试剂盒)(TMR-800-40)在这篇文章中的主要作用包括: 检测RcCDPK1的自磷酸化:文章中提到,通过使用pIMAGO试剂,研究人员能够检测到RcCDPK1(Ricinus communis Ca2+-dependent protein kinase-1)在体外实验中的自磷酸化活性。这表明RcCDPK1能够在特定条件下自我磷酸化,并且...
Chemiluminescence Detection 化学发光是一种化学反应,酶(通常是辣根过氧化物酶(HRP))催化化学底物(例如鲁米诺)的氧化反应,该氧化反应产生光作为副产物,光可由胶片或由数字成像仪捕获。 鲁米诺发光比较微弱,因此需要在反应体系中添加增强剂以增强信号,这种增强通常称为增强化学发光(ECL)。有许多种类的增强剂可用,其中一...
蛋白检测(Detection of proteins) 洗脱结束后,使用 Western 荧光检测试剂等ECL类试剂来检测蛋白。western发光液(简称ECL)由A液和B液1:1混合而成,一般一张膜加入1ml的ECL即可。将膜放在保鲜膜中间,ECL加入到膜上。将放有PVDF膜的保鲜膜放在暗盒中,将胶片放在保鲜膜上,关上暗盒。曝光的时间视荧光的亮度而定,荧光...
Immun-Blot® HRP 检测试剂盒 Immun-Blot HRP 检测试剂盒提供标准 HRP/4CN 比色检测 Western 印迹杂交膜所需的试剂,而且预混合缓冲液和酶底物使用更方便,试剂盒的所有组分都通过独立的印迹杂交质控测试。 预混合及独立包装的 HRP 比色底物 预混合酶底物试剂盒使用简便、可靠,并能减少 Western印迹膜显色过程中有...