WB实验标准protocol,成功完成Western Blot检测 成功完成Western Blot检测,必须满足4个条件: 1.凝胶洗脱:转移期间蛋白质必须从凝胶中洗脱出来,如果蛋白质还截留在凝胶中,将无法在膜上进行分析2.吸附到膜上:在转移过程中蛋白质必须吸附到膜上,如果蛋白不吸附,将无法在膜上进行分析3.处理期间仍截留在膜上:在转移后的...
Western blot素来就是个老生常谈的实验,饶是如此,新手们仍是深觉此坑易入不易出,但老司机却已经达到坐看云起时的淡然境界,原因无他,多番的千锤百炼早已练就了金刚不坏之身,深谙WB实验的他们对其流程中的任一细节都了如指掌。 现如今就将这素不外传的操作秘籍分享给大家,让大家可愉快与WB实验玩耍。
western blot protocolWestern Blot protocol SDS-PAGE:SDS-PolyAcrylamide Gel Electrophoresis 【原理】 Western Blot又称免疫印迹,是指将蛋白样品转移到固相载体上,而后利用相应的抗体来检测目的蛋白的一种方法。是检测混合样品中单一特定蛋白的常用技术。 Western Blot间接法基本原理:首先利用SDS-PAGE对蛋白质样品进行...
WesternBlot原理、protocol洗膜时间可以稍微长一点一抗和二抗的比例需要参考说明书保存和回收条件也是一抗是什么动物来源的二抗就是抗一抗动物的抗体比如说一抗是来源于rabbit二抗就是antirabbit WesternBlot原理、protocol 一、组织、细胞总蛋白抽提:参考相关裂解液; 二、蛋白浓度测定:BCA法,这个结果要参考说明书!
三、Western blot步骤: (一)、玻板的清洗: 自来水→75%酒精擦拭→ddH2O→竖放晾干/吹干(做胶的一面朝内)【勿用手指触摸玻板内侧面】装板: 低的一面向内,确认玻板底部平齐,插入斜楔板压实卡紧,加ddH2O不漏,滤纸吸干水; (二)、配胶(1.0mm): 分离胶 5% 浓缩胶, 3 ml/块胶 ...
https://www.youtube.com/watch?v=tL22O5yV9rA新手向,Western Blot Step-by-Step Protocol 详解,实验技术指南,熟肉, 视频播放量 1148、弹幕量 1、点赞数 47、投硬币枚数 8、收藏人数 155、转发人数 7, 视频作者 核能垃圾桶, 作者简介 工作太忙,更新随缘～,相关视频:【
WesternBlotprotocol实验步骤 WesternBlotprotocol实验步骤 Western Blot protocol 主要试剂及缓冲液的配制 1). 30%丙烯酰胺：将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为100ml的⽔中。搅拌器帮助溶解，滤纸过滤除杂质，避光保存于4度冰箱。2). 10% SDS：称量10g⼗⼆烷基硫酸钠，加⼊80ml超纯⽔...
Western Blot Introduction Western blotting uses antibodies to identify individual proteins within a cell or tissue lysate. Antibodies bind to highly specific sequences of amino acids, known as epitopes. Because amino acid sequences vary from protein to protein, western blotting analysis can be used ...
western_blot_protocol fmmuWestern blot实验技术 试剂配制 1. 10%过硫酸胺(AP) 过硫酸胺0.1g 超纯水1.0ml 溶解后,0.1ml分装4℃保存,保存时间为1周。 2.1.5MTris·HCl(pH8.8)lower buffer(下层缓冲液) Tris18.17g 超纯水80ml 浓盐酸调pH至8.8,最后用超纯水定容至100ml,过滤,4℃保存 3.1.0MTris·HCl(pH...
Western Blot protocolWestern Blot protocol 一、试剂准备 RPIA 1 ml PMSF 10μl Cocktail 20μl 1.蛋白裂解液配方: 2.1.5 mol/L Tris.HCL(PH 8.8) Tris base (MW 121.1)181.7gdd H2O 800 ml 溶解之后用浓盐酸调PH至8.8(一般加几滴即可,可以在调之前先测溶解液的PH,然后再估计浓盐酸的使用量),然后...