实验的重复性为了确保Western Blot实验结果的准确性和可靠性，建议进行多次独立重复实验。通过这种方法，我们可以更深入地解读实验结果图，并得出具有说服力的实验结论。同时，对于出现的复杂或不清晰的条带，可以借助其他实验方法进行进一步验证，以确保结果的准确性。
解决办法：根据情况调整蛋白量，同时一抗浓度和时间也可以缩短；经验：这种情况很容易出现，因为很多原因都可能导致这一个结果。一般来说，蛋白含量都是我们经过很多次摸索得出的最适蛋白量，因此不太可能是蛋白量过多引起的。最有可能的是因为一抗浓度太高，作用时间太长引起的。08.出现重影 原因：荧光强度比较高，...
条带有拖尾,表明蛋白质量不好,有降解;可能提蛋白过程动作太慢或蛋白保存条件不当; 提蛋白全程冰上操作,最好用新提的蛋白跑WB 图1 2. 显然目的蛋白量非常少,且每个样品定量不均一,曝光时间很长;定量时可以提高蛋白量或RIPA量减少 图2 3. 条带有粗有细,与2中相同的问题,蛋白定量不均一;也可在电泳时压缩...
Western blot,就是WB,蛋白质免疫印迹试验,是对目的蛋白进行检测的一种实验方法,大致分为以下7步:蛋白提取、蛋白定量、SDS-PAGE电泳、电转膜、封闭孔洞、抗原-抗体免疫反应、蛋白检测。 02 结果分析 研究组和对照组相比,2个屁、3个屁、4个屁处理以后,蛋白质...
WB(Western Blot), 即蛋白印迹或免疫印迹(immunoblotting),是一项在分子生物学、生物化学、免疫学等领域中应用非常广泛的技术。这一技术利用抗体与组织或细胞样品中特定蛋白的特异性结合作用,根据显色条带的位置和强弱实现蛋白鉴定表达分析。WB技术具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的搞特异性和敏感性。选用合适的...
为了准确分析 Western blot 的结果，我们通常会利用样本目的蛋白的光密度与内参照基因条带的光密度进行比较，从而得出不同样本间相对表达率。在实际操作中，内参照基因条带作为标准化工具，其光密度值被用来校正样本间的差异，比如由于样品加载量不同、蛋白质迁移率差异等造成的偏差。通过对目标蛋白条带与...
翻遍各种处理WB条带方法 感觉这种最简单直接 录成手把手的视频 希望能帮到同样有需要的人 (为了锻炼自己的英语 用英语进行了解说哈哈哈), 视频播放量 98、弹幕量 0、点赞数 5、投硬币枚数 0、收藏人数 0、转发人数 0, 视频作者 GaGa的星星兜, 作者简介 Ig: spst.gaga i’m
使用对照组数据正常化结果,或与其他标记物进行比较。 二、Western Blot定量分析: 1.获得图像: 使用胶片或数字成像系统捕获Blot图像。 2.选择合适的软件: 如ImageJ、Quantity One等进行图像分析。 3.背景减去: 选择一个没有条带的区域作为背景,使用软件减去背景。
经方又弥漫性较容易避免,洗膜 非特异性条带因 :一抗非特你无法判断Western Blot好看的你! 如果单纯一张比如兔的加成片展示的是的条带,可能了问题,比如够好,一抗浓度经 验:高背景可较为均一的背膜按照规定来带 特异性与蛋白断那一条是目中结果条带的张没有任何显成鼠的。 解 决一点信号都没原因是蛋白上...