Western Blot技术从提出至今已经有四十余年的时间了,如今仍然广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。然而想要得到一张条带清晰、没有杂带、背景干净的图片,还是具有一定挑战性的,即使出现了有问题的条带也不用慌张,里来分享结果条带图示+全面分析,方便大家优化WB实验进程与结...
实验的重复性为了确保Western Blot实验结果的准确性和可靠性,建议进行多次独立重复实验。通过这种方法,我们可以更深入地解读实验结果图,并得出具有说服力的实验结论。同时,对于出现的复杂或不清晰的条带,可以借助其他实验方法进行进一步验证,以确保结果的准确性。
条带有拖尾,表明蛋白质量不好,有降解;可能提蛋白过程动作太慢或蛋白保存条件不当; 提蛋白全程冰上操作,最好用新提的蛋白跑WB 图1 2. 显然目的蛋白量非常少,且每个样品定量不均一,曝光时间很长;定量时可以提高蛋白量或RIPA量减少 图2 3. 条带有粗有细,与2中相同的问题,蛋白定量不均一;也可在电泳时压缩...
【4】对照:通常在Western Blot实验中会使用对照样本,例如空白样本、阳性样本或阴性样本。通过比较对照样本和实验样本的条带,可以更准确地解释实验结果。 【5】显色:膜上的蛋白质会与特异性抗体结合,形成抗原-抗体复合物。然后,通过化学发光或放射性标记等方法进行显色,使抗原-抗体复合物可视化。 【6】图像分析:通过...
Western Blot是一种用于检测特定蛋白质在样本中的表达水平的实验技术。在分析Western Blot实验结果图时,了解一些基本概念和步骤是非常重要的。下面是一些关键点,可以帮助你更好地理解Western Blot的结果图:内参(Internal Control): 内参是实验中用来标准化不同样本之间的蛋白质含量的蛋白质。内参通常是一种在细胞中普遍...
western blot结果处理 一、PS处理条带图 1、打开Adobe Photoshop,新建2个A4纸张 (色彩选择RGB,RGB适用于电子屏幕显示(如手机、显示屏、笔记本电脑登),是一种发光的色彩模式,在黑暗的房间内仍然可以看见屏幕上的内容;CMYK适用于印刷/油墨打印,如喷绘、写真、印刷品等。)2、将要处理的WB结果拉入A4纸上,...
使用对照组数据正常化结果,或与其他标记物进行比较。 二、Western Blot定量分析: 1.获得图像: 使用胶片或数字成像系统捕获Blot图像。 2.选择合适的软件: 如ImageJ、Quantity One等进行图像分析。 3.背景减去: 选择一个没有条带的区域作为背景,使用软件减去背景。
为了准确分析 Western blot 的结果,我们通常会利用样本目的蛋白的光密度与内参照基因条带的光密度进行比较,从而得出不同样本间相对表达率。在实际操作中,内参照基因条带作为标准化工具,其光密度值被用来校正样本间的差异,比如由于样品加载量不同、蛋白质迁移率差异等造成的偏差。通过对目标蛋白条带与...
图6. 固态激光器与LED和白光光源的Western Blot成像结果对比 实战表现 图7. 删除baz-2或者set-6,H3K9me3水平降低,但是H3K9me1和H3K9me2水平没有降低。在N2,baz-2, baz-2和set-6, set-6秀丽隐杆线蠕虫模型中,H3K9甲基化水平代表性的定量Western Blot结果(左侧)定量分析结果(右侧)2;审稿人反馈意见。