WB的技术难点主要聚焦在选择合适的凝胶浓度、合适的电泳时间与电压、合适的转膜时间与合适的抗体稀释浓上。 凝胶的浓度取决于想要分离得到的蛋白浓度,要使不同分子量的蛋白充分延展,又要使蛋白不至于太容易泳出泳道。6%分离胶适用于中等至较大分子量的蛋白质(50-150 kD);8%分离胶适用于较小分子量的蛋白质(30-90...
Western Blot(简称WB),蛋白质免疫印迹法。是基于蛋白质SDS-PAGE电泳分离和特异性抗体识别蛋白的特性,通过显色技术,以达到检测目的蛋白的技术。该技术广泛应用于定性检测蛋白水平的表达,活性分析与鉴定。该实验步骤多,关键点多,耗时长,每个步骤可能都影响最终的结果,所以实验中经常出现各种问题。 相信Western blot做太多...
然而,在进行Western Blot实验时,可能会遇到一些问题,下面列举了一些常见问题及解决方法: 1.电泳条带不清晰或无条带: 解决方法: 检查样品质量,确保待检测样品是可用的,无降解或污染。 调整电泳参数,如电压、电流和时间等,以优化电泳效果。 更换抗体,确认抗体的特异性,避免非特异性结合。 2.膜上背景过重: 解决...
白板、条带浅问题解析 在Western Blot实验中，有时我们会遇到白板或条带浅的问题。这可能是由于多种原因造成的，包括抗体浓度不足、一抗或二抗与靶蛋白结合能力弱、显色时间不够长等。为了解决这些问题，我们可以尝试增加抗体浓度、优化一抗或二抗的孵育条件、延长显色时间等方法。通过这些措施，我们通常能够改善白板...
时代在发展,技术在进步。Western Blot已进入Digital Western Blot时代。为解决传统Western Blot面临的诸多问题,满足基础科研与生物制药单位的高质量数据要求,加快科研及研发进度——特推出DigitalWesternBlot专业检测服务: 一、技术服务平台优势 大:可检测大至440KD的大蛋白,不再为转膜效率低、转膜条带不均一烦恼 ...
blot可以特异性检测某个蛋白质分子,进行定 量,但是不能定位。 ②两种实验的一抗有时候不能通用,公司的产品说明一般都会说明可以进行什么实验,在免疫组化时,是否适合石蜡切片或者冰冻切片。 5 细胞水平要做western blot,多少细胞提的蛋白够做western blot?
1、western blot技术技术 甘肃中医药大学甘肃中医药大学 周文杰周文杰 Western Blot即即蛋白质印迹法蛋白质印迹法(免疫印迹免疫印迹试验试验),它是分子生物学、生物化学和免疫遗它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。传学中常用的一种实验方法。 蛋白质印迹的发明者一般认为是美国斯坦蛋白质印迹...
免疫印迹(Immunoblotting)又称为蛋白质印迹(Western Blot,WB),是一种综合性的免疫学检测技术,用于检测细胞或组织提取物中的蛋白表达水平。 这项技术利用待检测蛋白与抗体的特异性结合,测定生物样本中的蛋白水平,已经被广泛应用并得到公认。 目前,WB技术已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊...
Western Blot 实验步骤, 视频播放量 4804、弹幕量 1、点赞数 127、投硬币枚数 46、收藏人数 180、转发人数 30, 视频作者 ffffforget, 作者简介 不定期分享科研生活,欢迎交流,共同进步～,相关视频:【手术】切口疝修复,《伤寒论 》原文全脑记忆4.5小时 如何用八十个记忆