Western Blot即蛋白质印迹法(免疫印迹试验),是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。它是将电泳分离后的细胞或组织中蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达...
与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或...
Western Blot是一种用于分析生物样品中特定蛋白质的技术。其原理是采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）将蛋白质样品进行分离，然后将分离的蛋白质转移到固相载体上，例如硝酸纤维素薄膜（NC）。在这个过程中，蛋白质会以非共价键的形式吸附在载体上，并且保持其电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。Western Blo检测 接下来...
WB,是Western blotting的缩写,即蛋白质印迹法,又称免疫印迹(immunoblotting),也就通过电泳技术分离不同组分,再采用印迹技术将蛋白质转移(“印”)到特定的膜上,再利用抗原-抗体的特异性结合原理,用抗体作为探针去实现检测复杂样品中的靶标蛋白的方法,这项技术也可以用来检测不同时期蛋白表达的水平以及蛋白相互作用等...
该技术被广泛应用于研究基因在蛋白质水平的表达、检测抗体活性以及早期诊断疾病等多个领域。实验原理 蛋白质免疫印迹法，即Western Blot，基本原理涉及通过PAGE（聚丙烯酰胺凝胶电泳）对蛋白质样品进行分离，随后将其转移至固相载体，如硝酸纤维素薄膜（NC膜）或PVDF膜。固相载体以非共价键方式吸附蛋白质，同时能够保持电泳...
Western Blot技术在生命科学领域有着广泛的应用,包括: 3.1 Western Blot技术可以快速鉴定蛋白质的存在与纯度,通过与已知标准蛋白质比较可以进行定量分析。 3.2 通过Western Blot可以检测抗体的特异性和亲和力,验证抗体的质量和功能。 3.3 Western Blot可以用于检测蛋白质的磷酸化、甲基化、酰化等翻译后修饰,帮助我们了解蛋...
原理 Western blot(也称为蛋白质免疫印迹)是一种常用于研究中分离和鉴定蛋白质的技术。它利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) 来分离指定样品中包含的各种蛋白质,然后将分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或PVDF 膜上,接下来将膜与对感目标蛋白质的特异抗体一起孵育。在洗膜过程中,未结合的抗体被洗掉,只留下与目标...
Western blot原理及实验方法 一、 原理 Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质。“经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上...
WB(Western Blot,蛋白免疫印迹)是一种常规的蛋白分析技术,常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。 WB实验的基本核心理念是抗原抗体的特异性反应,通过变性胶 SDS-PAGE 将不同分子量的蛋白质分离开,然后转移到固相载体 PVDF 膜上,再用脱脂牛奶作为封闭液进行封闭和一抗稀释液进行稀释。待目的蛋白和抗体...