wb转膜缓冲液常用的配方是将200 mmol/L Tris、25 mmol/L甘氨酸和20%甲醇溶解后定容至1000 mL,室温保存,可重复使用3～5次。另外,还有一些其他配方的转膜液,比如Towbin缓冲液等,但最经典的还是上面提到的这个配方哦。
转膜液配方 Glycine 2.90 g Tris 5.80 g SDS 0/0.37/1g 甲醇 200 /0 ml ddH 2 O 定容至1 L 大蛋白(>100 kD): SDS 1 g,甲醇0 小蛋白(<100kD): SDS 0 g,甲醇200ml转膜过程中甲醇和SDS的作用 SDS的作用 SDS 跟蛋白质结合后,能使蛋白更容易从胶上转出来,但是它又能阻止蛋白与膜的结合。在转...
将转膜板放于转膜槽内,黑板对黑边。 倒入转膜液,放入冰袋。电流200mA,时间需预实验确定(推荐:75分子量以下120min,75分子量以上180min)。 (推荐:后面每步之间均需要TBST清洗,5min,4次) d. 封闭 转膜结束后,将整块PVDF膜放入孵育盒,TBST洗5min,倒入封闭液(根据封闭液不同,条带背景不同,封闭不同时间)。 e....
1 X转膜液(现配现用):Tris base3.03gGlyc ine14.42g甲醇150ml加水定容至1000ml6. 10 X TBSTris base 12.1gNaCl40g加水,用浓盐酸调整PH至7.6后定容至500ml7. TBST1 X TBS/ 吐温=1000/18. 封闭液:脱脂奶粉2gTBST40ml配己胶:先配分离胶,再配积层胶。一般两者同时配制,只是最后分离胶先加 TEME混合后立即...
WB试剂配方 10×转膜缓冲液(Tris-base19.3g ;Glycine 90g加去离子水至1L)1×转膜缓冲液(10×转膜缓冲液:甲醇:去离子水=1:2:7) 5×电泳液 Tris-base 15.15g Glycine 94g SDS 5g(SDS可水浴溶解) 加去离子水至1L 用前去离子水稀释成1×电泳液 1×Tris盐酸缓冲液(TBS)(pH8.0) 10mM Tris-base 1.21g ...
Western Blot 相关试剂配方 1. 1xTris-甘氨酸电泳缓冲液(1L) RIPA蛋白裂解液(100ml) Tris 3.02g Tris-HCI(PH8.0) 4ml 甘氨酸 18.80g SDS 1.00g 加纯水至1L 2. 1x半千转膜缓冲液(1L) 甘氨酸 14.4g Tris 3.0g 加纯水至800ml,临用前加入200ml甲醇 ...
wb洗膜配置1X转膜缓冲液采用甘氨酸2.9g、Tris 5.8g、SDS 0.37g、浓盐酸1.8 ml 、蒸馏水至800ml、加甲醇200ml定容至1000ml。10X 转膜缓冲液的配置是甘氨酸151.1g、Tris 30.3g、蒸馏水至1000ml溶解后室温保存，用时稀释10倍，并加入甲醇至20%。通常取80ml母液，加560ml蒸馏水，最后加160ml甲醇...
配方一：Tris 5.8g，甘氨酸 2.9g，SDS 0.376g 配方二：Tris 3.05g，甘氨酸 14.4g 甲醇都是200...
1X转膜缓冲液 (采用) 甘氨酸(MW75.07) 2.9 g Tris(MW121.14) 5.8 g SDS 0.37g 浓盐酸 1.8 ml 蒸馏水至 800ml 加甲醇200ml定容至1000ml 10XTBS缓冲液 Tris(MW121.14) 24.2g NaCl 80.0g KCl 2g 蒸馏水至 1000ml (浓HCl调pH至7.6),混匀室温保存。