1 X转膜液(现配现用):Tris base3.03gGlyc ine14.42g甲醇150ml加水定容至1000ml6. 10 X TBSTris base 12.1gNaCl40g加水,用浓盐酸调整PH至7.6后定容至500ml7. TBST1 X TBS/ 吐温=1000/18. 封闭液:脱脂奶粉2gTBST40ml配己胶:先配分离胶,再配积层胶。一般两者同时配制,只是最后分离胶先加 TEME混合后立即...
TBST配方 电泳时间 转膜三明治的制作 蛋白免疫印迹(Western Blotting)是将电泳分离后的蛋白质从凝胶转移到NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定蛋白的一种蛋白质检测技术。 电泳液配方 Glycine 18.80 g Tris 3.02 g SDS 1g 双蒸水 定容至1 L,提前1天配制,4℃保存转膜...
湿转与半干转(转膜方式)【WB实验外包】 1。湿转,顾名思义,就是由滤纸,膜,胶组成的三明治泡在转膜液中完成的转膜液通常的配方为:Tris 3.0 g,Glycine 14.4 g,甲醇:200 ml,加去离子水至1000 ml 2.半干转,…
wb洗膜配置1X转膜缓冲液采用甘氨酸2.9g、Tris 5.8g、SDS 0.37g、浓盐酸1.8 ml 、蒸馏水至800ml、加甲醇200ml定容至1000ml。10X 转膜缓冲液的配置是甘氨酸151.1g、Tris 30.3g、蒸馏水至1000ml溶解后室温保存，用时稀释10倍，并加入甲醇至20%。通常取80ml母液，加560ml蒸馏水，最后加160ml甲醇...
WB试剂配方10×转膜缓冲液(Tris-base19.3g;Glycine 90g加去离子水至1L) 1×转膜缓冲液(10×转膜缓冲液:甲醇:去离子水=1:2:7) 5×电泳液 Tris-base 15.15g Glycine 94g SDS 5g(SDS可水浴溶解) 加去离子水至1L 用前去离子水稀释成1×电泳液 1×Tris盐酸缓冲液(TBS)(pH8.0) 10mM Tris-base 1.21g ...
Western Blot 相关试剂配方 1. 1xTris-甘氨酸电泳缓冲液(1L) RIPA蛋白裂解液(100ml) Tris 3.02g Tris-HCI(PH8.0) 4ml 甘氨酸 18.80g SDS 1.00g 加纯水至1L 2. 1x半千转膜缓冲液(1L) 甘氨酸 14.4g Tris 3.0g 加纯水至800ml,临用前加入200ml甲醇 ...
根据转膜方式不同,转膜缓冲液配方也有一定变化,以下是两种常用转膜缓冲液配方:1.湿转缓冲液2.半干转缓冲液3.转膜完成之后,我们即可进行封闭和抗体孵育过程,这个过程中用量比较大的试剂是1X TBST洗涤液,其配方如下:转膜结束后,即可进行显色操作。目前一般采用增强化学发光(ECL)...
1。湿转,顾名思义,就是由滤纸,膜,胶组成的三明治泡在转膜液中完成的转膜液通常的配方为:Tris3.0g,Glycine14.4g,甲醇:200ml,加去离子水至1000ml 2.半干转,三明治在转膜过程中并没有浸没在转膜液中,但在转膜之前用相应的电转液浸泡滤纸,膜,胶一定时间。
转膜液:Tris 3.03g 甘氨酸 14.4g ddH2O 800ml 甲醇200ml TBST(10×):Tris 12.1g NaCl 40g ddH2O 500ml 02实验步骤 a. 配胶(以雅酶配胶盒为例) 推荐: 7.5%胶:分子量 30以上; 10%胶:分子量20~150; 12.5%胶:分子量50以下; 取玻璃板,长短各一。检查玻璃板是否干净,可用擦镜纸对玻璃板进行清洁。将两...