根据样本量,吸取3ul marker于胶板口(建议样本两侧都加3ul,防止边缘效应),并依次加入适量上样液(注:上样时需缓慢注入,样本第一次上样推荐10ul,副口,方便后期调整内参)。然后向电泳槽中加入适量电泳液。 电压120V,时间需预实验尝试确定(推荐60min),至marker分出所需位置marker后即可停止。 c. 转膜(湿转为例)...
1. 试剂配置与选择电泳液: 以100ml为基准,准备Tris 3.03g, 甘氨酸 18.8g, SDS 1g。转膜液: Tris 3.03g, 甘氨酸 14.4g, 800ml ddH2O和200ml甲醇混合。TBST(10×): Tris 12.1g, NaCl 40g, 500ml ddH2O。2. 实验步骤详解a. 配制和制胶使用雅酶配胶盒,根据样本选择胶浓度:7.5%(30kD...