蛋白Marker，也称为蛋白质分子量标准（Protein Molecular Weight Marker），是用于蛋白质电泳分析中的一系列已知分子量的蛋白质混合物。它们通常包含多个不同分子量的蛋白质条带，这些条带在电泳过程中会根据分子量的大小和电荷差异迁移不同的距离，从而在凝胶上形成一系列有序的条带。2、Marker在WB中的作用？分子量...
在WB实验中,蛋白marker的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小,只有标准量精确无误了,实验结果才有说服力,除此之外,蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用,所以选择正确的蛋白Marker也是western blot实验成功的必要条件之一。
主要表现为:1、预染marker经过化学修饰后分子量在SDS-PAGE上表现的迁移率不一致;2、预染marker无法在X光胶片上显色,X光胶片上显色的条带需要与转移到膜上的预染 Marker比对才能确认蛋白的位置和大小,整个过程比较繁琐同时容易造成误差甚至是错误。3、最重要的是目的条带和曝光Marker出现在...
Western Blot Marker由7种不同分子量的蛋白组成(19、20、35、45、60、65、110KDa),其中19、45、65KDa条带为蓝色预染marker,其它四个条带都可与人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、兔的IgG恒定区结合。Western Blot Marker可以直接结合二抗,或通过结合一抗间接结合二抗,因此蛋白Marker就能与抗原在同一张胶片上曝出信号...
良好的参照体系通常包括分子量Marker(用来确定蛋白条带对应的分子量大小,戳这里复习→)、空白载体对照(如果是诱导表达体系还应该有诱导前的对照),已知量标准产物的正对照、另外就是内参。 内参即是内部参照(Internal Control),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Proteins),它们在各...
预染蛋白marker55-320 kDa G2 预染蛋白marker8-200 kDa G20 预染蛋白marker8-195 kDa G20 曝光显影marker13-154kDa G20 曝光显影marker30-209kDa G20 -+ 加入购物车 商品介绍 规格与包装 售后保障 商品评价 本店好评商品 品牌:德威狮 商品名称:赛维尔 WB预染蛋白Marker彩虹条带Marker电泳蛋白分子量标准250ul...
良好的参照体系通常包括分子量Marker(用来确定蛋白条带对应的分子量大小)、空白载体对照(如果是诱导表达体系还应该有诱导前的对照)、已知量标准产物的正对照,另外还有内参。可是由于经费限制或者偷懒的原因,国内的不少人做Western Blot往往省略参照,导致结果出现问题时无法分析结果,即便有结果也可能影响结果的分析。
WB计算分子量与条带对应位置为什么会不同? 首先,SDS-PAGE电泳时分子量marker不能作为绝对标准,只是一个参考值。 其次,有的蛋白(如组蛋白和一些易形成dimer的蛋白,还有一些比较难变性而又形成紧凑的球形结构的蛋白)在用常规方法电泳时会出现异常行为(表观分子量与实际分子量不符)。
3、Marker条带要清晰锐利,分布均匀,颜色多样,这样才能更精确地指示蛋白分子量,还能让你的实验结果更加美观哦!接下来,说说内参抗体的选择!它可是WB实验成功的关键要素之一,千万别忽略!1、根据实验样本的种属选内参,比如哺乳动物常用b-actin、GAPDH等,植物则选Plant actin、Rubisco等。2、根据目的蛋白的表达位置选内参,...