点击“放置凝胶”,调整条带位置,直接保存为软件格式的ptl文件或截图保存为jpg格式。 拍marker步骤 在Image Lab软件中,选择“起始页-新建-应用程序-印迹”,然后选择第四个分折表。 不需要设置信号累计模式,直接点击“放置凝胶”,保存图片。 合并marker和条带 打开Image Lab软件,确保两张图片同时在软件里。 选择左侧...
3.3.2 电泳完marker形状正常但转完膜marker出现涣散。 大家在做WB时或多或少地都会遇到转膜后膜上的marker出现涣散的情况,即marker形状不凝集,像笔墨在纸上晕开的感觉。这样的话,显影出来的条带也会不凝集,散开,信号低,背景不均匀且高。这个问题也曾困扰我一段时间,一开始一直怀疑是转膜降温不良所致,直到最近才...
主要表现为:1、预染marker经过化学修饰后分子量在SDS-PAGE上表现的迁移率不一致;2、预染marker无法在X光胶片上显色,X光胶片上显色的条带需要与转移到膜上的预染 Marker比对才能确认蛋白的位置和大小,整个过程比较繁琐同时容易造成误差甚至是错误。3、最重要的是目的条带和曝光Marker出现在...
①蛋白预染Marker:采用预染色标记可以看见电泳过程中蛋白迁移的距离,为了便于观察电泳效果与转膜效果,以及判断蛋白分子量大小,在电泳时通常要使用预染的蛋白分子量标准。根据待测蛋白的分子量大小,挑选合适的Marker。 ②加入足量的样品:SDS-PAGE根据蛋白电泳迁移率将其分离,迁移率是蛋白大小和电荷的函数。我们建议在预制T...
marker应该在转完膜孵育抗体之前就可以看到是否成功转至膜上了。在显影时，如果用的是带有CCD相机的仪器...
商品名称:赛维尔 WB曝光可显影预染蛋白Marker 可同时结合二抗ECL胶片曝光 曝光显影marker13-154kDa G2086 商品编号:10086446105890 店铺:竹熊工业品专营店 货号:WHL9.20 类型:其他 适用范围:其他 类别:其他 更多参数>> 商品介绍加载中... 售后保障 卖家服务 ...
完成样本制备后，需进行SDS-PAGE电泳。根据目标蛋白的分子量大小选择合适的分离胶浓度，并配制分离胶和浓缩胶。待凝胶完全凝固后，进行上样与电泳操作。将蛋白样品和蛋白分子量标准（Marker）依次加入SDS-PAGE凝胶的加样孔中。调整电泳条件，启动电泳程序，进行蛋白的分离。转膜 准备转膜装置：将转膜所需的装置置于转膜...
在WB实验中,蛋白marker的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小,只有标准量精确无误了,实验结果才有说服力,除此之外,蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用,所以选择正确的蛋白Marker也是western blot实验成功的必要条件之一。
- 抗体或二抗加入过多:稀释抗体浓度或显影液浓度。4️⃣ marker条带呈黑色 - 抗体与marker反应:在分子量蛋白标准和第一个样品之间增加一个空白条带。5️⃣ 目的条带染色过低/过高 - 分离不彻底:改变凝胶比例,大分子蛋白用低浓度胶,小分子蛋白用高浓度胶。6️⃣ 相同蛋白杂交出现大小不均匀条带 ...
经验分享:电压120V,4 h,245KD Marker条带差不多到分离胶中间位置,蛋白上样缓冲液会漏到电泳槽,不要回收电泳液,以免污染下一次实验的结果。 3)转膜 ① 膜的选择 转印膜一般有PVDF膜或NC膜。跑大分子蛋白选择PVDF膜。如果有甲醇存在,大分子蛋白很容易沉淀。而PVDF膜不需要在转移buffer中添加甲醇,目的蛋白转印的...