常用的分离胶浓度有6%、8%、10%、12%,分子量越大,所用的胶浓度越低,蛋白电泳速度越快。例如,测定100kDa分子量以上的蛋白可选择8%浓度的分离胶;测定20kDa分子量以下的蛋白可选择15%浓度的分离胶,中间的分子量可选用12%浓度的分离胶。 在Western Blot(WB)实验中,SDS-PAGE分离胶通常根据分子量范围的需求来选择...
梯度胶的制作比普通凝胶的制作流程复杂一些,但如果你来自土豪实验室,可以买现成的预制胶(上面提到的普通凝胶也有预制胶),省时省力还更安全(减少了接触有毒有害物质),批间一致性好,再也不用提前制胶,随时来一场说跑就跑的电泳,梯度胶跑出来的条带还更好看噢,可以说是胶中爱马仕,除了贵没有缺点,哎,贫民窟女孩...
书上写丙烯酰胺浓度为10%的胶线性分离范围是20-80k，为什么我用10%的胶跑mark只能跑到35k的样子。以前...
用Tris-tricine SDS-PAGE电泳,电泳时分别管制三层凝胶,分离胶用40%T丙稀酰胺(2.6%C)浓度为16.5%,另外两层都用30%丙稀酰胺,中间一层浓度为10%,积层胶浓度为4%,凝胶厚度1mm,转膜的条件试过30V70分钟,膜上可见到小分子蛋白marker的条带,似乎见到目的条带,上样量为60μg细胞胞浆总蛋白,转膜的条件怎么样合适?
分离胶:用1.5M Tris-HCL 8.8、10%分离胶。(所谓的10%浓度为Acr-Bis的浓度,即丙烯酰胺的浓度,用水定容,其他成分不变);浓缩胶:用1M Tirs-HCL 6.8、浓度:5%。 2、上样电泳: 所用梳子为15孔,Marker占用一孔,故每块凝胶可以检测14支样品。上样量:Marker:5 μl/孔; 样品:20μl/孔;参数:80V,待样品跑出...
首先是配制分离胶,因为分离胶处于底层,需要提前配制,在此以10%的分离胶配制为例,具体配方如表2: 表2 10%分离胶配制不同体积的配制办法 待分离胶凝固后配制浓缩胶,一般需要30min。接着是配制浓缩胶,因浓缩胶处于上层,所以要后配制,一般配制为5%的浓缩胶,具体配制办法见表3。
我们提供的预制胶系统有8%,10%,12%,15%,4%-15%,4-20%,8-20%多种规格,可供您的选择更多,为您的实验贴心服务。 产品信息: 爱必信特色产品线: 生化试剂(60万种)、抗体(10万种)、细胞因子、二抗、ECL发光液、蛋白marker、激动剂、抑制剂、凋亡试剂盒、BSA、动植物提取物、蛋白酶K、组化笔......
1.出现跑胶时,marker之间距离很长的现象 如图所示,10%的胶,出现marker之间的距离过长,由于在跑的过程中已经出现,遂考虑配胶及跑胶的问题,先后换了新的丙烯酰胺、10% SDS、Tris-Hcl缓冲液、Temed均未改善,最后考虑到是否是10% APS于常温放置过久导致,更换新的4度的APS,恢复正常条带 ...
不同分离胶的配方见图二,不同分离胶的根据所跑目的蛋白分子量进行选择,主要如下: 6%分离胶,适用75-200kDa 8%分离胶,适用50-150kDa 10%分离胶,适用23-120kDa 12%分离胶,适用18-100kDa 15%分离胶,适用10-40kDa 祝大家科研,多发paper!#科研#研究生日常#研究生#每天学习一点点#技术分享...
10% 过硫酸铵溶液(AP): 取0.1g过硫酸铵,加入EP尖管,加入1ml水,混匀,室温放置,避光保存(放在抽屉中)。或者称多少配多少(X mg AP粉末,配成10X μl液体)。注意现用现配,避光保存。不需要配太多,每两块胶只需要75ul的AP溶液。 三、玻璃板的清洗 ...